HIV检测宣传资料.ppt

点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 其他快速诊断方法 免疫斑点和免疫层析 免疫胶体金 （或胶体硒） 唾液、尿液检测卡 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 快速诊断方法的特点 敏感度、特异度低于ELISA，且价格贵 快速诊断阳性结果还需经ELISA方法验证 适用于血站覆盖不到的边远地区/城市大医院急诊、手术前检查 快速、不需特殊仪器 HIV感染的实验室检测 * 初筛试验：酶联免疫吸附（ELISA）、凝集实验、唾液、尿液检测卡以及斑点印迹试验等 确认试验：免疫印迹法(WB)、免疫荧光试验(IFA)、条带免疫试验 以及放射免疫沉淀试验(RIPA) 常用HIV抗体检测方法： 免疫印迹法（WB） 常用的确认实验方法是免疫印迹法（WB） 免疫印迹试剂有HIV-1/2混合型和单一型，一般先用HIV-1/2混合型试剂进行检测 HIV病毒蛋白用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）,把分子量大小不等的蛋白带分离开来，然后再把这些分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。将此膜切割成条状，每一条硝酸纤维膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血清样品与硝酸纤维素膜一起孵育，恒温震荡，使其充分接触反应，血清中若含有抗HIV抗体，就会与膜条上的带相结合。加入抗人-IgG酶结合物和底物后，即可使有反应的抗原-抗体结合带呈现紫褐色，根据出现条带情况判定结果。 HIV抗体诊断— WB结果判定标准（我国） HIV-1抗体阳性：至少有2条env带（gp41和gp160/gp120）出现或至少1 条env带和p24带同时出现 HIV-2抗体血清学阳性：出现至少2条env带（gp36和gp140/ gp105） 以上均要符合试剂盒提供的阳性判定标准。 抗体阳性 无HIV抗体特异性带出现 抗体阴性 出现HIV特异性抗体带,但带型不足以确认阳性者 抗体可疑 HIV抗体诊断— WB结果判定标准（我国） WB检测的优缺点 优点：WB的敏感性和特异性均较高。其假阳性率低于1/2万，假阴性率约为1/25万。其较高的特异性主要基于HIV不同抗原组分的分离以及浓缩和纯化。由于能够同时检测多种抗体以及对阳性判定的要求必须有两条以上的条带出现，因而能够用WB方法鉴别初筛试验的假阳性结果。 缺点：相对窗口期较长，灵敏度稍差，技术要求高，影响因素多，操作不当和误判带型的假阳性率2%，而且成本高昂，因此只适合作为确证实验。随着第三代和第四代HIV诊断试剂灵敏度的提高，WB已越来越满足不了对其作为确证实验的要求。另外，文献报道大约4%～20%的样品经过HIV初筛复检阳性后，WB结果为“不确定。 WB不确定结果 当出现任何HIV病毒特异条带，但不足以被判断为阳性则判定为不确定结果。 不仅初筛阳性的标本可以出现不确定的结果，初筛阴性的标本经WB检测也有大约15%出现针对一个或几个抗原的不确定结果。 WB不确定结果的出现确实给临床诊断带来困难，需要更多的时间和实验进一步确认，也会对受试者造成额外的心理负担。从另一方面而言，WB不确定结果确是受试者真实的血清学反应。 WB出现不确定结果的原因 检测对象： HIV及相关感染：早期血清学转换 、AIDS晚期 、早产感染 、HIV缺失株感染 、免疫静止型AIDS 、HIV-2感染 、散发 HIV/SIV(猴免疫缺陷病毒) 其它逆转录病毒感染：山羊关节炎-脑炎病毒 其它临床状态：自身免疫疾病（系统性红斑狼疮，原发性干燥综合征）、麻风病、恶性肿瘤、高胆红素、高核蛋白、高类风湿因子 无感染：HIV阳性母亲所生的正常婴儿、未筛查血液制品的接受者、疫苗试验志愿者、保持WB结果不变的供者 WB出现不确定结果的原因 检测试剂 ： 宿主细胞蛋白残留、判断准则、试剂盒的条件 优化/稳定性 实验操作 ： 交叉污染、试验程序、仪器设备、样本处理及 溶血 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 点击添加文本 免疫荧光试验(IFA) 放射免疫 沉淀试验(RIPA) 条带免疫试验 其他HIV抗体确认实验 * 其他： CD4+/CD8+ T cell 计数等 与艾滋病相关的免疫细胞检测 与艾滋病相关的免疫细胞检测 外周血中CD4+T淋巴细胞的数量对于确定HIV感染状态、是否进入AIDS期、机会性感染及肿瘤发病的可能性以及评价治疗效果具有极其重要的作用。 HIV-1感染并破坏CD4+T细胞 CD4+T细胞的下降导致机体免疫缺陷 免疫缺陷导致机会性感染或肿瘤 获得性免疫缺陷综合征 AIDS Q:艾滋病的“潜伏期”和“窗口期”这两个概念。它们是同一回事吗？如果不是，它们之间有什么区