《PCR技术简介》PPT课件.ppt

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《PCR技术简介》PPT课件

PCR技术简介;主要内容;PCR的概念;DNA的复制 核酸体外扩增的设想 1985年Mullis等人发明了聚合酶链反应(PCR) 耐热DNA聚合酶的应用使得PCR能高效率的进行,随后诞生了第一台PCR自动化热循环仪 1989年美国《Science》杂志列PCR为十余项重大科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年 1993年,Mullis等因此项技术获诺贝尔化学奖 ;PCR的原理;2.复性(退火):通过降低反应温度至45-700C,使两种引物能与两条解开的DNA互补链的3`端粘合。 ;;PCR的主要用途;PCR反应体系;PCR实验准备—试剂;Mg2+ Mg2+是DNA聚合酶的激活剂 1.5mmol/L-2.5mmol/L反应体系(通常4 ?l/50 ?l ) Mg2+浓度过低会使Taq酶活性丧失、PCR产量下降; Mg2+过高影响反应特异性;PCR实验准备—试剂;PCR实验准备—试剂;PCR实验准备—试剂;PCR实验准备—试剂;PCR实验准备—试剂;PCR实验准备--试剂;PCR实验准备--仪器、耗材;;PCR反应程序;PCR反应程序;PCR操作过程;PCR操作过程;PCR操作过程;RT-PCR(reverse transcriptional-PCR);RT-PCR原理;RT-PCR主要用途;RT-PCR反应体系;RT-PCR反应体系;RT-PCR的准备--试剂;RT-PCR的准备--耗材、仪器;RT-PCR反应程序;RT-PCR操作过程;琼脂糖凝胶电泳的原理;琼脂糖凝胶电泳的主要用途;琼脂糖凝胶电泳的准备--试剂;琼脂糖凝胶电泳的准备--仪器、耗材;琼脂糖凝胶电泳的操作过程;琼脂糖凝胶电泳的操作过程;;;琼脂糖凝胶电泳的操作过程;琼脂糖凝胶电泳的注意事项;;

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