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动物体液采集
动物体液采集 (一)实验动物尿液的采集
实验动物尿液的采集可分为自然排尿收集法和强制排尿收集法。
1. 大鼠、小鼠、沙鼠的尿液收集
(1)自然排尿法
通常用代谢笼配上粪尿分离漏斗收集尿液。
收集时将大鼠、小鼠、沙鼠装入特制的代谢笼里,笼下放置洁净、干燥的玻璃粪尿分离漏斗,将漏斗与代谢笼的锥形漏斗口连接,侧口接一个150~200ml集尿容器,按试验要求定时收集、量取一定时段的尿液,供进一步实验用。
我们还可根据采尿目的来选择不同的代谢笼,也可根据不同的采尿目的对代谢笼进行适当的改良。
(2)强制排尿法
将大鼠、小鼠、沙鼠固定好后,按压骶骨两侧的腰背部或者轻轻压迫膀胱的体表部位,使其排尿后,将尿液收集到预先准备好的平皿或铝箔容器中。
2. 豚鼠尿液的收集
(1)自然排尿法:使用大鼠或家兔用的代谢笼收集。
(2)强制排尿法:同大鼠、小鼠、沙鼠的收集法。
3. 家兔尿液的收集
(1)自然排尿法
也称留尿法,通常用代谢笼配上粪尿分离漏斗收家兔尿液。收集时将家兔置于兔代谢笼里,笼下放置玻璃的粪尿分离漏斗与代谢笼的锥形漏斗口连接,侧口接一个较大集尿容器收集尿液。或在通常使用的饲养笼下放置收集尿液的容器(金属网或采尿盒等)。
(2)强制排尿法:包括逼尿法和导尿法
(1)逼尿法是一人把家兔抱住,另一人右手由家兔腹腔向下逐渐用力压迫膀胱,逼出尿液。
(2)导尿法则是把家兔仰卧固定于手术台上,先在尿道口周围常规消毒,左手将尿道口充分暴露,且固定之,右手握幼儿导尿管(尖部涂一层凡士林或甘油),顺尿道往里送入,一旦导尿管进入膀胱腔,即见尿液流出,有时无尿流出,可将导尿管适当上下左右转动,见尿流出为此。采集雄性动物时,用一只手握住阴茎,另一只手将阴茎包皮向下拽,暴露龟头的龟裂,使尿道口张开,缓慢将导尿管从外尿道口插入,在尿道括约肌部有少许抵抗感。不要强行插入,轻轻地向膀胱部导入,尿自然导出。采集雌性动物时,外尿道口在阴道前庭的里面,从外面看不到,沿着阴道腹侧的阴蒂在阴道前庭腹侧壁将导尿管的尖端插入,也可以插入尿道口,此后方法同雄性动物。
4. 犬尿液的收集
(1)托盘法收集尿液
待犬下午进食完毕后,撤去饲料关闭饮用水,换上干净无水的笼底托盘。次日晨用吸管吸取托盘中的尿液约1mL,放入5ml的一次性离心管中。
(2)收集管法收集尿液
收集尿液前,收去残留的饲料,关闭饮用水,将笼底板冲洗干净,在盘后放置特制尿液收集管,约4小时后取下尿液收集管,将尿液倒入实验容器中根据需要取用。
(二)实验动物血液的采集
实验动物的采血方法很多,按采血部位不同可分为尾部采血、耳部采血、眼部采血、心脏采血、大血管采血等。选择什么部位与采用何种实验方法,需要根据实验动物种类、检测目的、试验方法而定。一般而言,实验动物血液的总量为55-77mL/kg,单次动物采血量一般应低于实验动物总血量的15%,常见实验动物的采血部位及采血量见表4-2-14。
表4-2-14 实验动物常见采血部位及采血量
部位 采血量 采血前置
小鼠 大鼠
部
分
采
血 尾静脉 0.03-0.05 0.30-0.50
麻醉或不麻醉均可
尾动脉 0.10-0.30 0.50-1.00
足背中静脉 0.10-0.30
眼眶静脉丛 0.05-0.10 0.5-1.0
0.50-0.80 3.00-5.00
全
采
血 颈静脉 0.50-1.00 3.00-5.00 麻醉手术
颈动脉 0.50-1.00 麻醉手术
断头 0.50-1.00 5.00-10.00 麻醉手术
心脏 0.50-0.80 3.00-5.00 麻醉手术
后大静脉 0.50-1.00 2.00-4.00 麻醉手术
腹大动脉 5.00-8.00 麻醉手术
股静脉 麻醉手术
股动脉 麻醉手术
部位 采血量 采血前置
豚鼠 家兔
部分
采血 耳动脉 0.50 5.00-10.00
耳静脉 0.50 2.00-5.00
全
采
血 颈静脉 麻醉手术
颈动脉 80.00-120.00 麻醉手术
断头 麻醉手术
心脏 5.00-10.00 80.00-100.00 麻醉手术
后大静脉 3.00-5.00 麻醉手术
腹大动脉 麻醉手术
股静脉 麻醉手术
颈静脉 3.00-5.00 麻醉手术
引自:中国协和医科大学主编“实验动物技术与管理”(内部教材)42
1. 大鼠、小鼠断头采血
(1)准备好试管并编号,置试管架内。根据实验需要可选用1%肝素钠溶液0.1ml或 0.2%乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na)0.1ml作抗凝剂。
(2)戴上棉纱手套,用左手拇指和食指捉持鼠头部,以手掌握住动物的身体及双前肢,抓牢动物将鼠颈部朝下。
(3
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