中药制剂分析_第六章中药制剂中各主要成分的分析【医学课件ppt】.ppt

第六章 中药制剂中各主要成分的分析 第一节 生物碱类 第二节 黄酮类 第三节 三萜皂苷类 第四节 醌类 第五节 挥发油类 第六节 其他成分 第一节 生物碱类 一、结构特征及理化性质 二、定性鉴别 三、含量测定 四、应用举例 一、结构特征及理化性质 （一）结构特征 生物碱大多结构复杂且类型众多，主要有杂环类、萜类、甾类及有机胺类等。结构中氮原子存在形式多种多样，如脂氮、芳氮；季铵、叔胺、仲胺及伯胺；游离状态和与酸结合状态等。此外，结构中常有多种取代基存在，如烃基、羟基、羧基、酯基等。 一、结构特征及理化性质 （二）理化性质 1. 物理性状 多数生物碱为结晶型固体，少数为无定形粉末，个别小分子生物碱为液体，如槟榔碱、烟碱等。液体生物碱及个别小分子生物碱具有挥发性和升华性，如麻黄碱具有挥发性、咖啡因具有升华性等。一般生物碱为无色或白色，结构中存在较长共轭体系时可显不同颜色，如黄连生物碱显黄色。 2. 溶解性 大多数生物碱属亲脂性成分，游离状态下难溶于水，易溶于氯仿、乙醚、丙酮、甲醇、乙醇等有机溶剂；与酸结合成盐后水溶性增加，但与不同酸生成的盐水溶性有差异，一般含氧无机酸及小分子有机酸的生物碱盐水溶性较大。季铵型生物碱、生物碱氮氧化物易溶于水，一些小分子生物碱则既可溶于水也可溶于有机溶剂。含有酸性基团(如酚羟基、羧基)的生物碱可溶于不同碱性的碱水溶液中，含有内酯环、内酰胺结构的生物碱可溶于热苛性碱水溶液。 3. 酸碱性 大多数生物碱具有不同程度的碱性。碱性强弱取决于生物碱结构中氮原子的杂化方式、电子云密度分布以及分子的立体效应、氢键效应等。酰胺类生物碱一般碱性较弱，几呈中性；如果在生物碱结构中尚存在酸性基团，则同时会表现出酸碱两性。 一、结构特征及理化性质 4. 沉淀反应 大多数生物碱在酸性水溶液中可以与生物碱沉淀试剂(如碘化物复盐、重金属盐和大分子酸等)生成不溶于水的复盐或分子复合物，借以检查中药制剂中生物碱的存在和测定中药制剂中生物碱成分的含量。但须注意的是，共存的蛋白质、多肽和鞣质等成分，也可与生物碱沉淀试剂生成沉淀，产生假阳性。因此，用沉淀反应进行中药制剂中生物碱成分分析时，要用适宜的方法先行处理样品供试液，排除干扰。 5. 显色反应 少数生物碱可与特定试剂反应产生不同颜色。生物碱在一定pH条件下可与一些酸性染料定量结合，生成有色络合物，被氯仿等有机溶剂定量提取；具有酯键结构的生物碱，如乌头碱等，可与异羟肟酸铁试剂反应产生紫红色。这些显色反应可用于中药制剂中生物碱成分的分析。 6. 紫外光谱特征 结构中具有共轭体系的生物碱可产生 紫外吸收，如吡啶类、喹啉类、吲哚类生物碱等。吸收峰位置和强度除与助色团的种类、位置、数目有关外，需要特别指出的是，生物碱结构中的氮原子若与发色团直接连接或参与发色团，则还与测定溶剂的pH有关。 二、定性鉴别 （一）理化鉴别 沉淀反应是生物碱理化鉴别常用方法，一般在酸性水溶液中进行，苦味酸试剂和三硝基间苯二酚试剂也可在中性条件下进行。由于中药制剂成分复杂，一些非生物碱成分可能引起假阳性结果，因此，制备样品供试液时必须净化处理，以除去干扰成分，方能用沉淀反应进行中药制剂中生物碱类成分的鉴别。另一方面，少数生物碱不能与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应，可能引起假阴性结果，如麻黄碱。 二、定性鉴别 （二）色谱鉴别 1. 薄层色谱法 常用硅胶或氧化铝薄层色谱。制备供试品溶液时，要根据被测成分的特点，如存在状态、溶解性及共存成分的性质等，选用适宜的溶剂和方法进行提取，提取液浓缩后或净化处理后，用有机溶剂溶解，点在薄层板上。展开剂常选择氯仿、苯等低极性溶剂，再根据待检识成分的极性加入其他溶剂调整极性，以达到满意的分离效果。由于硅胶显弱酸性，分离检识生物碱时，易导致色谱斑点Rf值很小、拖尾或形成复斑等，因此在硅胶吸附薄层色谱中，常用碱性系统或在碱性环境下展开。薄层色谱展开后，除少数有色生物碱可直接在可见光下观察，有荧光的生物碱可在紫外灯下观察外，绝大多数生物碱需喷试剂显色。最常用的显色试剂是改良碘化铋钾试剂，喷洒后大多数生物碱显橘红色斑点，有时为了提高显色灵敏度，可在喷碘化铋钾试剂之后，再喷硝酸钠试剂。此外还可选用硫酸铈、碘铂酸等作为显色试剂。个别生物碱的显色试剂特殊，如麻黄碱，一般用茚三酮试剂显色。 二、定性鉴别 2. 纸色谱法 纸色谱法可用于生物碱盐或游离生物碱的鉴别。鉴别生物碱盐时，一般以水为固定相，极性较大的酸性溶剂为展开剂，最常用的是正丁醇-醋酸-水(BAW)系统。如果用一定pH的酸性缓冲液为固定相，则选用极性较小的溶剂系统为展开剂。鉴别游离生物碱时，常用甲酰胺作固定相，以甲酰胺饱和的亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙酸乙酯为展开剂。 3. 高效液相色谱法 高效液相色谱法对结