中药制剂分析第五章各成分分析.ppt

第七节 其他成分分析 一、香豆素类成分 2、定性鉴别 荧光法 薄层荧光鉴别 七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素的鉴别 取本品10g，研细，加醋酸乙酯20ml、盐酸0.5ml，超声处 理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解， 作为供试品溶液。 薄层条件：硅胶G薄层板，展开剂正已烷—醋酸乙酯（4:1）， 显色剂为10%氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯365nm下检视。 药物分析学科 第七节 其他成分分析 一、香豆素类成分 3、含量测定 可见-紫外分光光度法： 荧光光度法：专属性强 TLCS：薄层荧光扫描 HPLC：C18，甲醇-水，UVD or FD GC：分子量小，具有挥发性 药物分析学科 第七节 其他成分分析 一、香豆素类成分 乌蛇止痒丸中蛇床子素的含量测定 色谱条件 固定相：OV-1，2m×3mmID玻璃柱；气体流速：N2 30ml/min，H2 50ml/min，Air 500ml/min；柱温：200℃；进样器和检测器温度：260℃。 供试品溶液和对照品溶液的制备 精密称取内标物正廿三烷适量，加氯仿溶解，制成每1ml约含6mg的溶液，作为内标溶液。取乌蛇止痒丸适量，研成细粉，精密称取约5g，置索氏提取器中，精密加入内标溶液5.0ml，加氯仿80ml，回流至近无色。将提取液浓缩至数毫升，通过3g小型硅胶柱，用氯仿洗脱至10ml量瓶中，加氯仿至刻度，摇匀，作为供试品溶液。称取蛇床子素约25mg，加入内标溶液5.0ml，振摇使溶解，摇匀，作为对照品溶液。 校正因子的测定 精密吸取对照品溶液，连续进样3～5次，每次2μl，按峰面积计算校正因子。 样品测定 精密吸取供试品溶液，连续进样3～5次，每次2μl，用校正因子计算样品含量。 药物分析学科 第七节 其他成分分析 二、有机酸类成分 1、定性鉴别 吸附色谱 分配色谱 2、含量测定 酸碱滴定法→总有机酸 分光光度法 高效液相色谱法 薄层色谱法 其他方法 药物分析学科 第七节 其他成分分析 三、环烯醚萜类成分 特殊的单萜 物理性状（存在的形态；多苦味；稳定性差，易聚合） 溶解性：易溶于水、甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇 薄层定性鉴别 吸附剂：硅胶、聚酰胺 显色剂：硫酸乙醇，茴香醛试液，香草醛硫酸试液，对二甲氨基苯 甲醛硫酸试液 龙胆苦苷 药物分析学科 第七节 其他成分分析 三、环烯醚萜类成分 含量测定 高效液相色谱法 薄层扫描法 荧光分光光度法 分光光度法 复方栀子冲剂中栀子甙的含量测定 精密称取本品3g，置索氏提取器内，加甲醇回流提取6小时， 回收甲醇至干，加水10ml溶解，用水饱和正丁醇提取，提取 液蒸干，以甲醇溶解，通过已处理好的活性炭-中性氧化铝柱， 用甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用2ml甲醇溶 解，作为供试品溶液。 薄层条件：硅胶GF254薄层板，展开剂氯仿—甲醇—25%氨 水（4:1:0.1），检测波长247nm，参比波长370nm。 药物分析学科 第七节 其他成分分析 四、单萜及二萜类成分 1、含芍药甙中药制剂的分析 薄层色谱 高效液相色谱 2、含穿心莲内酯中药制剂的分析 薄层色谱 回滴法 比色法—总内酯 薄层扫描或高效液相色谱法—单体成分 穿心莲内酯 药物分析学科 第七节 其他成分分析 五、多糖 1、鉴别 TLC：硅胶、纤维素、硅藻土 PC：展开剂：正丁醇、水混合体系 显色剂：苯胺-邻苯二甲酸的正丁醇饱和水溶液等 CE：滤纸电泳、玻璃纤维纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、凝胶电泳 HPLC：氨基柱 GC-MS：酸水解→中和→柱前衍生→GC-MS 2、提取分离：水提醇沉 ※防止水解，注意消除酶、酸、碱等的影响 药物分析学科 第七节 其他成分分析 五、多糖 3、含量测定 1）总多糖的测定（例题P153） 3,5-二硝基水杨酸比色法→棕红色（550nm） 苯酚-硫酸法→蓝绿色（480-490nm） 蒽酮-硫酸法→黄绿色（620nm） 2）单体多糖的含量测定 高效凝胶液相色谱法→确定分子量 高效液相色谱法→确定组成 色谱柱：氨基键合相硅胶柱，或普通硅胶柱 检测器：示差折光检测器 药物分析学科 习 题 1、当采用硅胶薄层色谱法鉴别生物碱成分时，为什么常有斑点Rf 值较小或斑点明显拖尾的现象？可采用哪些方法克服？ 2、酸性染料比色法测定中药制剂中生物碱成分时，关键是什么？ 3、简述聚酰胺薄层色谱分离黄酮类化合物的原理和特点。 4、简述HPLC-ELSD检测人参皂苷等成分的优点。 5、总多糖的主要含量测定方法有哪些？ 6、设计：止喘灵注射液处方组成为麻黄、洋金花、苦杏仁、连翘， 请设计用薄层色谱法鉴别其中洋金花的方法。（样品供试液制备可 根据方法原理用流程表示，薄层色谱法请注明选用的吸附剂及薄层 原理、