植物克隆技术复习用PPT.ppt

获得细胞 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 葡萄糖、动物血清 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 具 体应用 得到 动 物 组 织 培 养 胚胎或幼龄动物的脏器 单 个 细 胞 机械消化、胰蛋白酶消化 原 代 培养 培养液 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 传代培养 大量的组织细胞(构成组织或器官) 修复受损皮肤、器官等 细胞株或细胞系 动 物 组 织 培 养 胚胎或幼龄动物的脏器 单 个 细 胞 机械消化、胰蛋白酶消化 原 代 培养 培养液 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等 传代培养 药物 研究治疗癌症的药物及其疗效 某物质 检测有毒物质、致癌物质等 细胞株或细胞系 2005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信息说,“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。科研人员欲采用一定的技术手段探究三氯生对人体是否有危害。请回答： 1、根据所学的动物细胞工程知识，采取下列哪种技术手段最合适 A、动物细胞融合 B、动物细胞培养 C、胚胎移植 D、核移植 2、根据上述选择，请你设计一个实验来探究“三氯生”对人体是否有危害。 （1）该实验的原理是 B 许多致畸物质加入动物细胞培养液后，培养细胞会发生染色体结构或数目的变异。根据变异细胞占观察培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性 （2）实验方法步骤： ① 材料准备：从医院妇产科获得所需要的原始材料组织，浓度为0.09%的三氯生试剂,高倍显微镜,培养瓶若干,配置好的培养液,剪刀,培养箱,所需要的酶. ②制备检测细胞 ⅰ配置细胞悬浮液: （ ） ⅱ将细胞悬浮液分装到两个以上的培养瓶中,置于培养箱中培养一段时间. ③ 配置培养液:取两个培养瓶,分别编号1、2， （ ） 将上述组织用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶使其分散成单个细胞，然后利用培养液配置成一定浓度的细胞悬浮液 分别往其中加入等量的配置好的培养液，再往1号瓶中滴加 几滴0.09%的“三氯生”试剂，摇匀 ④将上述某一个培养状况较好的培养瓶中的细胞培养液分成两份，分别加入1、2号培养瓶中，培养一段时间。 ⑤检测过程：分别从1、2号培养瓶中取样做多次镜检，计算出变异细胞占观察培养细胞的百分数。 ⑥预期结果和结论： a:若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分比相当，则说明“三氯生”对人体无害。 b:若1号培养瓶中变异细胞百分数大于2号，则说明“三氯生”对人体有害。 克隆培养法（细胞克隆） ——把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个细胞群体的技术。 细胞克隆的最基本要求：克隆来源于单个细胞 细胞克隆较易成功的细胞： 无限细胞系、转化细胞系、肿瘤细胞 提高细胞克隆形成率的措施： 选择适宜的培养基、添加血清、以滋养细胞支持生长、激素刺激、使用CO2培养箱调节pH 细胞克隆的最主要用途之一： 分离缺乏特殊基因的突变细胞系 动物的细胞融合技术及其应用 细胞融合是将不同种类的两种细胞经过特殊处理后放在一起，在某些促融因子作用下发生融合，形成杂种细胞。 细胞A 细胞B 融合细胞 灭活的仙台病毒、PEG 等促融剂 电融合 动物的细胞融合技术及其应用 基因型不同的细胞融合就是细胞杂交 基因定位 一、动物细胞融合的原理： 与植物细胞原生质体融合的基本原理相同 利用:细胞膜的流动性 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 电刺激 化学（聚乙二醇） 电融合、PEG、灭活的仙台病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 ★单克隆抗体 传统方法获取抗体，产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。 1、起因：抗体的作用很大 传统获取抗体的方法： 某种抗原注射到动物体内（需要反复注射） 动物体内产生抗体 从动物的 血清中分离出所需要的抗体 科学家分析、探索过程： 1、体内B淋巴细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体； 2、每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 3、临床医学目的：获得大量的单一抗体 理论方法：用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆，形成细胞群，由该细胞群就能产生出单克隆抗体（化学性质单一、特异性强的抗体） 4、遇到的难题：体外培养