油樟DN提取的研究毕业论文.doc

本科毕业论文（设计） 毕业论文 题 目： 油樟DNA提取的研究 专 业： 生 物 科 学 学生姓名： 学生学号： 030601023 系 级 班： 生物工程03级1班 指导教师： 职称: 教 授 宜宾学院教务处制 摘要 油樟是樟科樟属植物，本课题主要研究油樟根茎叶DNA的提取方法以及对根茎叶DNA提取效果进行对比分析。油樟的细胞内含有大量的多糖、多酚、鞣质等次生代谢物,针对这一情况本研究在常规CTAB法的基础上做了进一步改进，成功提取出了高质量DNA。做的改进主要有：①在CTAB提取缓冲液中加入2gPVP以除去酚类杂质；②将DNA样品溶于TE缓冲液中保存时在样品中加入3μlRNaseA，以除去RNA。用改进CTAB法提取的DNA得率和纯度都较高。用改进CTAB法提取的油樟根DNA得率小于油樟茎DNA的得率小于油樟叶DNA得率，由于植物各组织器官的基因组DNA是相同的，因此宜用更易研磨成细粉的油樟嫩叶来提取油樟DNA，用做科研和教学。 关键词：油樟；DNA；CTAB（十二烷基三甲基溴化铵）；电泳；光吸收 Abstract Cinnamomum longepaniculatum belongs to laurel family and Lauraceae species. The topics studied mainly the method of extracting DNA and compared the DNA extracting methods from roots, branches of Cinnamomum longepaniculatum . Cells of Cinnamomum longepaniculatum contain a large number of polysaccharides, polyphenols, tannins, and other secondary metabolites. Based on conventional CTAB method, a serial of improvements were carried out and high-quality DNA was successfully obtained. The main improvements are: ① 2g PVP was added into CTAB extraction buffer to remove impurities phenols; ② 3μl RNaseA into the samples when DNA samples preserved in TE buffer to remove RNA. Improved CTAB extraction of DNA yield and purity was higher. The DNA yield using improved CTAB extraction was roots stems leaves. Because genomic DNA is same, it is easier to extract DNA from leaves of Cinnamomum longepaniculatum for research. Keywords: Cinnamomum longepaniculatum; DNA; CTAB method of DNA; electrophoresis; absorbing value of light 目 录 摘要 I Abstract II 第1章 绪论 1 第2章 油樟根茎叶DNA的提取方法 3 1.材料、药品、仪器 3 1.1 材料 3 1.2主要试剂溶液 3 1.3 主要仪器设备 4 2.实验方法和步骤 4 2.1 常规方法的提取 4 2.2改良CTAB法 5 2.3 油樟根、茎、叶DNA提取的比较方法 6 3.结果及分析 6 3.1 0.8%琼脂糖凝胶电泳结果及分析 6 3.2 紫外光谱分析 8 4.讨论 10 4.1 CTAB法的基本原理 10 4.2 几种主要试剂的作用与对比 10 4.3 方法的探索及改进 11 4.4 注意要点 12 4.5 实验过程中遇到的问题及对策 12 5.总结 13 5.1 13 5.2 13 5.3 13 参考文献 14 致谢 15 文献综述 16第1章 绪论 图1-1油樟 如图1-1油樟[Cinnamomum longepaniculatum