20130409人感染H7N9禽流感标本的采集运输保存及检测.pptVIP

B类包装（UN3373） * 注：BSL-n/ABSL-n：代表不同生物安全级别的实验室/动物实验室 a大量活菌操作：实验操作涉及 “大量”病原菌的制备，或易产生气溶胶的实验操作（如病原菌离心、冻干等）。 b动物感染实验：特指以活菌感染的动物实验。 c样本检测：包括样本的病原菌分离纯化、药物敏感性实验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取、涂片、显微观察等初步检测活动。 d非感染性材料的实验：如不含致病性活菌材料的分子生物学、免疫学等实验。 * 标本需由专人专车运送，不得邮寄。 * 专用标本运送箱 * * 人感染H7N9禽流感病毒标本采集、保存、运送 临海市疾病预防控制中心 样本采集 标本保存和运输 主要内容 原始标本采集 呼吸道病毒的诊断取决于高质量标本的采集，及其保存运输等环节。多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次为气管和支气管分泌物及尸检组织。标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存。 标本采集人员 　　医疗机构的医生、护士或疾病预防控制中心专业人员负责标本采集并填写标本登记表，标本采集人员按照相关要求做好个人防护。 个人防护设备（PPE） 采集前的准备 口罩 (N-95 or N/P/R-100) 手套 帽子 鞋套 防护服 防护目镜 采集物品包 采集前的准备 常用的采样液/病毒运输液(VTM） 采集前的准备 pH 7.4～7.6的Hanks液 MEM/DMEM液 在采样液中需加入抗菌素，可用青霉素（终浓度为100U/ml）、庆大霉素（终浓度为1mg/ml）和抗真菌药物（终浓度为2μg/ml）。 在无菌的带螺旋塑料管分装2-3ml采样液。最好储存在:–20℃,4℃可放48–96h,室温1–2天。 采样拭子：使用头部为聚酯纤维的病毒采样拭子（鼻及口咽型），铝或塑料做柄，不推荐棉拭子和木柄 1.监测病例，同时具备以下4项条件的病例： （1）发热(腋下体温≥38℃)； （2）具有肺炎的影像学特征； （3）发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计 数减少； （4）不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。 2.人感染H7N9禽流感疑似病例与确诊病例，定义参照《人感染H7N9禽流感诊疗方案（2013年第1版）》 采集对象 上呼吸道标本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液 下呼吸道标本：气管吸取物、肺洗液、肺组织标本 血清标本：发病7天内急性期血清和间隔2-4周的恢复期血清 如病人死亡，可采集组织标本：肺组织、气管、支气管组织等 标本种类 应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本） 症状出现后尽早采集 尽量在抗病毒药物使用前采集 血清标本应采集发病早期和恢复期双份血清； 标本种类 咽拭子 标本采集 用2根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。 √ × 鼻拭子 标本采集 将1根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。取另一根聚丙烯纤维头的塑料杆拭子以同样的方法采集另一侧鼻孔。上述两根拭子浸入同一含3ml采样液的管中，尾部弃去，旋紧管盖。 鼻咽抽取物或气管抽取物 标本采集 用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小孩导尿管接在50ml注射器上来替代收集器） 5.血清：采集5ml静脉血加入消毒试管中，离心分离血清，分2管，每管不少于0.5ml。放入带螺旋盖管内， 于-20℃以下保存。 6.尸检组织：死亡后尽早解剖，采集肺组织、气管分泌物标本，置无菌容器中（50ml螺口塑料管）， 于-70℃以下保存。 尽快运到实验室 24小时内可以检测的可以保存在4℃，超过24小时-70℃冻存。流感病毒在-20℃～-40℃时不稳定，故长期保存应在-70℃温度以下，不要冻存于-20℃，会降低流感病毒的检出率 避免反复冻融，冰上一周也比冻融一次要好 血清标本暂时存在可在4℃冰箱，长期保存于-20℃冰箱。 标本保存 根据《人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第一版）》规定，H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染的病原微生物名录》中高致病性禽流感病毒进行管理 标本包装和运输 标本必须放在密封的带螺旋盖的、耐低温的塑料管内，直接在塑料管上用油性记号笔写明编号、种类、姓名及采样日期，再放入塑料密封袋内，每袋装一份标本 同时将标本有关信息填入标本送检单 送检单应信息完整，放入另一塑料袋内，不能与标本放置一起 标本包装和运输 标本包装和运输 病毒培养物按照A类感染性物质进行包