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实验实习与研究性课题专题复习
实验、实习和研究性课题专题复习
一.显微镜
1.1.显微镜的使用:
(1)使用方法:拿法、安放、对光、低倍镜使用、高倍镜使用。
(2)低倍镜使用:
转动转换器,将低倍镜正对通光孔;
转动粗准焦螺旋,使镜筒下降,两眼注视物镜,直到物镜镜头接近标本为止;
左眼注视目镜,右眼睁开,反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升,直到看清物像时为止。
(3)高倍镜使用:
先使用低倍镜;(目的;找到目标,将目标移到视野中央)
把低倍镜移走,换上高倍镜;
调节细准焦螺旋和光圈,直到看清物像。
1.2.显微镜使用注意事项:
(1)成像特点:放大倒立对称的虚像。给你字、图,指出在显微镜下观察到的图象。
(2)放大倍数计算:物镜的放大倍数×目镱的放大倍数。放大倍数指的是物体的长或宽(线性放大)。
(3)物像的移动方向与装片的移动方向相反。
物像的移动方向(同向移动)、顺时针或逆时针方向等。
(4)低倍镜下成像特点:物像小、细胞数目多、光线亮。
高倍镜下成像特点:物像大、细胞数目少、光线暗。
(5)物镜和目镜的判断方法:
物镜有螺纹,目镜无螺纹。
(6)放大倍数的判断方法:
目镜:镜头长,放大倍数小;镜头短放大倍数大(反比)。
物镜:镜头长放大倍数大,镜头短放大倍数小(正比)。
物镜与装片之间的距离:距离近放大倍数大,距离远放大倍数小(反比)。
(7)显微镜的有关性能参数。最重要的性能参数是分辨率,而不是放大倍数。
(8)由低倍镜换成高倍镜,若观察目标与周围环境对比度大,则增加光照;若观察目标与周围环境对比度小,则减小光照。
二.生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
还原性糖(葡萄糖、麦芽糖、果糖)与斐林试剂作用生成砖红色沉淀;脂肪被苏丹Ⅲ染成橘黄色,被苏丹Ⅳ染成红色;蛋白质与双缩脲试剂发生作用产生紫色反应。斐林试剂试剂 A液B液先混合均匀再使用,双缩脲甲液乙液分开使用,先甲液再乙液。脂肪的鉴定中需要用到显微镜。
1.实验原理:某些化学试剂能够与生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
还原糖 + 斐林试剂: 砖红色的沉淀
脂肪 + 苏丹Ⅲ染液 :橘黄色的颗粒
(苏丹Ⅳ染液) (红色)
蛋白质 + 双缩尿试剂 :紫色物质
2.实验方法步骤:
可溶性还原糖的鉴定:制备组织样液(提取或分离出含还原性糖的过程)
↓
鉴定样液 (取样液2mL于试管中→加刚配的斐林试剂2mL→水浴2min左右→观察颜色变化)
脂肪的鉴定:制作切片(含脂肪量越高的组织越好,切片越薄越好)
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1~2水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察)
蛋白质的鉴定:制备样液(制备豆浆或稀释蛋清)
↓
鉴定(试管中加样液2mL→加2mL双缩尿试剂摇均→双缩尿试剂B试剂3~4滴摇均→观察颜色变化)
三.细胞质流动的观察
加速细胞质流动的方法有:适当加温、光照和用刀片切割。
1.实验原理:活的细胞中细胞质处于不断流动的状态,由于细胞质的流动可导致细胞器的运动,因此观察细胞质的流动,可用细胞质中的叶绿体等运动作为标志来进行观察。
2.实验材料:最好用黑藻幼嫩的叶片(优点是叶片扁平、薄,含有叶绿体易观察),
3.方法步骤:
(1)取材制作临时装片:在载玻片中央滴一滴清水,取黑藻幼嫩的叶片于清中,盖上盖玻片。
(2)观察:低倍镜下找到细胞,高倍镜下观察。观察细胞质的流动速度和方向。
注意问题
(1)为提高细胞质的流动性,可事先将材料放在光下、室温条件下培养;或观察时提高放置黑藻的水温;或切伤一小部分叶片……
(2)用低倍显微镜观察时应找到靠近叶脉部位的叶肉细胞,因为此处水分充足,细胞质流动更明显。
(3)细胞质流动是活细胞所具有的性质,因此,可以利用观察细胞质是否流动来判断细胞的死活……
(4)细胞质流动的方式有环流式、穿梭流动式……
四.高倍显微镜下叶绿体的观察
1.高倍镜的使用时注意
(1)低倍镜使用过程中,下降镜筒时必须双眼侧视镜筒,防止镜头撞到玻片。
(2)低倍镜找到物像后,换上高倍镜时,观察过程中只能使用细准焦螺旋。
2.用高倍镜观察叶绿体
(1)实验原理:植物的某些细胞的细胞质中运动着叶绿体,叶绿体与细胞的其它细胞器在颜色上有明显的差别,且形态相对比较大,因此可用高倍镜观察。
(2)实验材料:普通显微镜能够观察的材料,必须是薄的、近乎透明的。观察叶绿体应
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