实验7 粗糙链孢霉子囊孢子的分离与交换.pptVIP

实验7 粗糙链孢霉子囊孢子的分离和交换 一、实验目的 1、了解顺序四分体的遗传分析方法 2、掌握重组值的计算方法：着丝粒作图 3、基因转换 二、实验原理 1、作为遗传分析材料的原因： 后代多，样本大，统计分析误差小 生活周期短 易培养，易筛选突变型 单倍体，不存在显隐问题 孢子按顺序排列在子囊中 二、实验原理 2、生活史 粗糙链孢霉（Neurospore crassa，2n=14） 生活史包括无性和有性两个世代。 三、实验材料、用具及药品  粗糙链孢霉：野生型（lys+）菌株，赖氨酸缺陷型（lys-）菌株。 显微镜、恒温箱、高压灭菌锅、酒精灯、三角烧瓶、试管、培养皿、载玻片、镊子、接种针、解剖针、滤纸。 四、实验步骤  1、杂交培养基的配制： 将浸软的玉米粒剪碎，每试管2-3粒，加入3毫升2%的琼脂，再放入经多次折叠的滤纸。（3-4厘米），加上棉塞，消毒即可。 五、实验作业 每人接种杂交一支试管，待子囊果长成后进行观察，按不同的子囊类型记数填入表格，并计算基因与着丝点间的交换值。 ? 杂交培养基的配制： 将浸软的玉米粒剪碎，每试管2-3粒，加入3毫升2%的琼脂，再放入经多次折叠的滤纸。（3-4厘米），加上棉塞，消毒即可。 * * 从交换型子囊数占总子囊数的百分比，可以计算出该基因与着丝点间的交换值： 2、菌种活化? 3、接种杂交 4、收集子囊果? 在长有棕黑色子囊果的试管中，加5%苯酚，静置15分，摇动片刻，倒入平皿中。 4、镜检观察? 取一载玻片，滴1-2滴5%苯酚溶液，然后用解剖针将子囊果挑出放到载玻片上（若子囊果上附着的分生孢子过多，可先在5%苯酚溶液中洗涤，再移到载玻片上），再用镊子柄平压或盖上另一载玻片，用手指压片，压开子囊果，使子囊充分压散而末破裂，最后在显微镜下观察记录子囊孢子在子囊中的排列顺序。