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显微镜的使用与细胞形态的观察
实验一 显微镜的使用及微生物形态观察 目的要求 显微镜使用的原理 实验材料 实验程序 目 的 要 求 掌握显微镜的结构、原理,学习显微镜的操作方法和保养 观察微生物的个体形态,学会生物图的绘制 显微镜的结构 显微镜的构造 1.机械部分:镜座、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、载物台移动器、调节器等部件.它起着支持、 调节、固定等作用. 2.光学部分:目镜 、 物镜 、 照明装置(聚光镜、 光圈、 反光镜等). 它使检视物放大,造成物象. 显微镜的光学原理 显微镜的放大倍数和分辨率 1. 放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率 是表示显微镜辨析物体(两端)两点之间距离的能力,可用公式表示为: δ=0.61×λ/ [n· sin(α/2)] 式中δ :物镜分辨出物体两点间的最短距离。 ?:可见光的波长(平均0.55?m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率。 ?:镜口角。 显微镜的光学原理 油镜使用的原理 油镜,即油浸物镜。当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时,由于空气与玻片的密度不同,使光线受到曲折,发生散射,降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油(其折射率与玻片的相近),则几乎不发生折射,增加了视野的进光量,从而使物象更加清晰。 显微镜的操作方法 低倍镜的操作 1. 置显微镜于固定的桌上。 2. 旋动转换器,将低倍镜移到镜筒下方与之对直。 3. 转动反光镜向着光源处,同时用眼对准目镜,仔细观察,视野亮度均匀。 4. 将标本放在载物台上,使观察的目的物置于圆孔的正中央。 5. 将粗调节器向下旋转,眼睛注视物镜,以防物镜和载玻片相碰,当物镜的尖端距载玻片约0.5cm处时停止旋转。 6. 左眼向目镜观察,调节粗、细调节器直至目的物清晰为止。 显微镜的操作方法 高倍镜的操作 1. 使用高倍镜之前,先用低倍镜观察,将目的物移至视野正中央。 2. 旋动转换器换成高倍镜,调节细调节器直至目的物清晰;如果高倍镜触及载玻片应立即停止旋动,说明原来低倍镜没有调准焦距,应重调低倍镜,找到目的物。 显微镜的操作方法 油镜的操作 1. 如果用高倍镜未能看清目的物,则可用油镜。应先用低倍镜和高倍镜检查标本片,将目的物移到视野正中。 2. 在载玻片上滴一滴香柏油(或液体石蜡),将油镜移至正中央,使油镜头浸没在油中,刚好贴近载玻片。用细调节器微微向上调。 3. 油镜观察完毕,用擦镜纸将镜头上的油擦净,另用蘸少许二甲苯的擦镜纸擦镜头,最后再用擦镜纸擦干净。 实 验 材 料 显微镜、擦镜纸、香柏油、二甲苯 各种形态细菌、细菌鞭毛、荚膜、放线菌和藻类的示范片。 实验程序Ⅰ(显微镜的使用) 主要是油镜的使用 1.用前检查:零件是否齐全,镜头是否清洁。 2.调节光亮度 3.低倍镜观察:粗调、细调 4.依次再进行中倍、高倍观察 5.油镜观察:高倍镜下找到清晰的物象后,在标本中央滴一滴香柏油,使油镜镜头浸入香柏油中,细调至看清物象为止。 6.换片:另换新片,必须从第三条开始操作。 7.用后复原:观察完毕,上悬镜筒,先用擦镜纸擦去镜头上的油,然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯擦去残留的油,最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯,后将镜体全部复原。 实验程序Ⅱ(个体形态观察) 严格按光学显微镜的操作方法,依低倍、高倍及油镜的次序逐个观察各种形态的细菌示范片,并绘出其形态图。 同法逐个观察大肠杆菌的示范片,并绘出其形态图。 同法逐个观察金黄色葡萄球菌的示范片,并绘出其形态图。 实验程序Ⅲ (显微镜的保养) 显微
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