3章7节-组分表和校正.docVIP

三章七节：HW2000色谱工作站-组分表与校正 本次课以“平行样1.hw”为例讲解组分表的建立和校正。 组分表有什么用?建立峰与化学物质之间的定性联系。这个在N2000里面讲过了。 校正有什么用？是除了归一法之外必须要做的，目的是建立峰面积或者峰高与物质浓度之间的参数，用于定量分析所必需的，实际上就是回归过程。在N2000里面也讲过了校正。 HW2000中组分表的建立在上节课中讲过了。这次课主要讲校正。 首先打开“平行样1.hw”。这是一个只有谱图，而没有进行后期处理的数据文件。下图显示了许多没有化学物质名称的峰。 谱图基本处理参数没有设置： 谱图处理方案也没有： 组分表未设置： 定量方法还是归一法： 定量结果表为空： 我们的基本思路是： 第一步：如何计算校正因子：现在打开的这个文件是一个化学物质成分和化学物质浓度已知的标准样品。我们将每个化学物质的峰面积和浓度进行回归，得出校正因子。 第二步：如何用校正因子进行定量分析：将这些校正因子应用于其它的相似样品，求其它相似样品的化学物质浓度。 第一步：如何计算校正因子 首先做一个标准样并获得其谱图文件 打开一个标准样品的图谱文件，由于标准样品的化学物质的名称和浓度已知，所以可以用峰面积或峰高与化学物质浓度作回归，从而得到校正因子。 编制或者载入用于获得校正因子的方法文件 涉及到组分表的编制、积分方法的选择、谱图杂峰的处理等项目。 考虑到组分表的制作已经讲过，大家也比较熟悉了积分方法的设置，也知道如何去除噪音峰和杂峰。因此，进行校正操作之前的这些步骤已经完成并保存在一个方法文件中。此方法文件名称为“校正.tab”。请导入这个方法，其操作为： 当导入这个方法之后，6个表格发生了变化，如下： 谱图参数表中改变了峰宽和峰面积（筛子） 谱图处理表去掉了一些杂峰 组分表加了组分和浓度 注意：因为我们测的是标准样，所以化学组分和浓度都是已知的。化学组分的浓度应该放在这里，进行校正时，系统会从这个表内读取浓度数据，而不是其它表！！！！ 在下图的“定量方法”选项卡中选择 “计算校正因子” 注意：必须选择“计算校正因子”才可以进行校正因子的计算。其它选项不能计算校正因子。“归一”不涉及校正因子，为什么？因为它只根据峰面积等响应因子来计算百分比浓度。校正归一、单点校正、多点校正都需要校正因子，但是它们都是“利用”校正因子而不是“产生”校正因子的。 定量根据：本例选择峰面积，浓度计算结果不管它，工作曲线就是回归的标准曲线，就是校正过程，校正就在这里进行。 因子校正 首先需要进行定量计算，然后在定量组分表取校正因子即可。 来看一看定量结果表： 定量结果为空？ 需要进行计算，如右图： 结果如下图： 注意，保留时间、组分名称、浓度，都是系统自动从定量组分表里面照抄过来的。 峰面积、峰高、半高峰宽是积分计算的。 校正因子是利用浓度与峰面积进行回归得出的。 下一步可以回到定量组分表格内，取校正因子，校正因子即自动写入每个化学成分中。如下二图： 接下来选择定量组分表中的一下三个列 单击右键复制 新建一个Excel文件将数据粘贴 如图粘贴了数据，在以后相似的样品可以直接将此数据贴入 粘贴数据到EXCEL是为了以后的计算方便。 如何获得每个化学组分的回归方程？ 首先确定在“视图”―――“选项”中的“打印”选项卡允许打印工作曲线方程。 其次在“定量结果表”中将“当前表存档”。 此过程是将峰面积和浓度数据读入内存，以备进行回归之用。 确保通道中只有1档数据，如果有2档以上的数据，需要清除已存档 重新“当前表存档” 成功了！！ 回到“定量方法”表格，进行工作曲线计算 计算成功 查看任意一个组分 确定无误之后，打印报告。 下面的结构看起来是不是很详细？很可信？很有所谓的科学性？ 提醒：将你当前编辑的方法输出吧，毕竟花了很大的功夫做的。 第二步：如何用校正因子进行定量分析 有了校正因子，定量分析变得就比较简单了。 首先打开一个未知样品，“未知样品.hw” 方法的编制或者载入 直接载入一个方法：“单点校正－无校正因子.tab”。 在这个方法中已经对于谱图进行了处理，并选择了“单点校正”的积分方法。 输入校正因子 在这个方法的定量组分表中，已经将组分加入了，但是没有校正因子和浓度。浓度是不需要填写的，因为浓度未知；校正因子是需要填写的，因为我们已经在上一次操作中获得了校正因子，并需要用校正因子来定量分析。如下图： 你可以单独将Excel中的校正因子粘贴，也可将套峰时间、组分名称和校正因子三者都粘贴。本例中只粘贴校正因子。 根据校正因子进行计算 粘贴入校正因子之后，确认定量方法为面积单点校正法： 单击计算按钮，原先空白的定量结果表立即出现了如下图的数据：