20个常用肿瘤实验.doc

1. HYPERLINK /experiment/1.htm 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 标签： 大肠杆菌 感受态细胞 转化 本实验以E.coli DH5a菌株为受体细胞，并用CaCl2处理，使其处于感受态，然后与pBS质粒共保温，实现转化。由于pBS质粒带有氨苄青霉素抗性基因（Ampr），可通过Amp抗性来筛选转化子。如受体细胞没有转入pBS，则在含Amp的培养基上不能生长。转化子扩增后，可将转化的质粒提取出，进行电泳、酶切等进一步鉴定。 具体步骤：/experiment/430/453/454/25118.htm 2. HYPERLINK /experiment/134.htm 微生物鉴定中常用的生化反应 标签： 微生物 生化反应 鉴定 有些细菌具有合成淀粉酶的能力，可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降，可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8（红）～8.0（黄）。当细菌分解脂肪产生脂肪酸时，则菌落周围培养基中 具体步骤： HYPERLINK /experiment/430/531/532/31647.htm /experiment/430/531/532/31647.htm 3. HYPERLINK /experiment/74.htm PCR扩增和扩增产物克隆 标签： PCR 扩增 克隆 PCR(Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法.它包括三个基本步骤：(1) 变性(Denature)：目的双链DNA片段在94℃下解链；(2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对；(3) 延伸(Extension):在Taq DNA聚合酶合成DNA的最适温度下，以目的DNA为模板进行合成。 具体步骤：/experiment/430/457/458/15663.htm 4.  HYPERLINK /experiment/1.htm 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 标签： 大肠杆菌 感受态细胞 转化 本实验以E.coli DH5a菌株为受体细胞，并用CaCl2处理，使其处于感受态，然后与pBS质粒共保温，实现转化。由于pBS质粒带有氨苄青霉素抗性基因（Ampr），可通过Amp抗性来筛选转化子。如受体细胞没有转入pBS，则在含Amp的培养基上不???生长。转化子扩增后，可将转化的质粒提取出，进行电泳、酶切等进一步鉴定 具体步骤： HYPERLINK /experiment/430/453/454/25118.htm /experiment/430/453/454/25118.htm 5.  HYPERLINK /experiment/163.htm 人胃癌裸鼠原位种植转移模型建立 标签： 裸鼠 胃肿瘤 肿瘤移植 1969年Rygaard等首次成功将人类结肠癌移植于裸鼠后，多种人类肿瘤已经在裸鼠体内移植成功，从而开辟了利用动物研究人类肿瘤的广阔前景。以往的研究大多将癌组织直接移植于裸鼠皮下，但是这种模型由于周围结缔组织包裹，往往形成局部肿瘤而很少发生远处转移。20世纪九十年代以后国内外学者相继建立了人类肿瘤裸鼠原位移植（orthotopic tranplantation）模型 具体步骤： HYPERLINK /experiment/430/539/564/566/18862.htm /experiment/430/539/564/566/18862.htm 6.  HYPERLINK /experiment/96.htm 免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程 标签： 免疫 共沉淀 蛋白质 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是：当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下 具体步骤； HYPERLINK /experiment/430/502/527/529/31631_1.htm /experiment/430/502/527/529/31631_1.htm 7.  HYPERLINK /experiment/73.htm PCR技术原理、实验步骤和应用 标签： PCR 原理 步骤 应用 PCR技术，即聚合