_金黄色葡萄球菌检验（staphylococcus）课件.ppt

12.5 金黄色葡萄球菌检测 生物学特性---菌体形态及培养特征 革兰氏阳性球菌，直径为0.8-1.0微米，镜检时呈单个、成对、四联或不规则的簇群； 无芽孢，不运动； 兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好； 可在15%氯化钠和40%胆汁中生长 生物学特性---菌体形态及培养特征 产生蛋白酶、脂肪酶、磷脂酶、脂酶和溶菌酶，大多数菌株可水解天然的动物蛋白，例如血红蛋白、纤维蛋白、卵白、酪朊和多肽类如明胶，水解脂类、吐温类和磷脂蛋白质，并释放脂肪酸； 所有的毒株产生凝固酶，人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。 金黄色葡萄球菌的检验 方法：增菌培养法、直接计算法 （一）增菌培养法的检验步骤（程序） 检验操作要点 1：增菌：7.5%Nacl肉汤，37℃24h，呈均匀浑浊生长。 2：平板分离：血平板,37℃ 24~48h 菌落成金黄色，大而突起，圆形，不透明，表面光滑，周围有透明溶血圈（β型） 在B-P平板上的菌落特征: 为圆形，光滑凸起、湿润、Ф2-3mm，呈灰色至黑色，边缘色淡周围为浑浊带，在其外层有一透明带。 检测步骤---分离 BP平板： 胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和痕量矿物元素 丙酮酸钠是一种生长促进剂 亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性，并使菌落产生黑色 卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环 甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。 检测步骤---分离 在BP平板上其典型菌落为：圆形，光滑突起，湿润，直径2-3mm，颜色呈灰色到黑玉色，边缘常为淡色（米黄色或灰白色略带灰色或黄色的白色），周围为一混浊带，在其外缘常有一透明圈。用接种针接触菌落似有黄油树胶的粘稠感。 BP平板 检测步骤---鉴定 金黄色葡萄球菌可以产生凝固酶，因此对其鉴别的主要实验是测定其凝固酶。 Any questions? * * 凝固酶（coagulase） 致病性葡萄球菌产生的一种能凝固人和兔血浆的蛋白质。 使液态的纤维蛋白原变成固态的纤维蛋白，进而使血浆凝固。 金黄色葡萄球菌的感染易于局限化和形成血栓亦与凝固酶有关。此酶是鉴定该菌的重要依据。 金黄色葡萄球菌的检验 检样→稀释→7.5%NaCl 肉汤增菌培养 →血平板、B—P分离→镜检、 血浆凝固酶试验→报告结果 25g样品+ 225ml 生理盐水 5mL样品匀液（1:10）+ 50mL胰酪胨大豆肉汤 血平板 36± 1℃ 24hr 镜 检 营养肉汤 血浆凝固酶 实验 报告结果 定性 检测 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 6hr BP平板