医学微生物学第22章 病毒感染检查方法与防治原则.pptVIP

课件 第22章 病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 病毒感染的检查方法 二、 病毒的分离培养与鉴定（virus isolation and determination） （一）病毒的分离培养 动物接种 选择易感动物及接种部位，观察发病情况 鸡胚培养 不同病毒选择不同接种部位（绒毛尿囊膜，尿囊腔，羊膜腔，卵黄囊），分离流感病毒最常用。 细胞培养：分离病毒最常用的方法 （1）原代细胞—来源于动物、鸡胚、人胚组织细胞，对多种病毒敏感，但只能传2-3代。 （2）二倍体细胞—在体外分裂50-100代后仍保持2倍体染色体数目的单层细胞。 （3）传代细胞—能在体外无限传代的细胞多由癌细胞或二倍体细胞突变而来。 病毒在培养细胞中增殖的指标 细胞病变效应（CPE）：即某些病毒在细胞内增殖引起的特有的细胞病变（细胞变圆、聚集、坏死、脱落等） 红细胞吸附 干扰现象 细胞代谢改变（pH） （二）病毒的鉴定 核酸类型、理化性状、形态、血清学鉴定、基因测序和生物对比。 （三）病毒的数量与感染性测定 1.50％组织细胞感染量 2.红细胞凝集试验 3.空斑形成试验 三、病毒感染的血清学诊断 用已知病毒抗原检测病人血清中相应抗体以诊断病毒性疾病（中和实验、补体结合实验、血凝抑制实验、凝胶免疫扩散等） 四、 病毒感染的快速诊断 (一)?? 形态学 电镜和免疫电镜——直接观察病毒 光镜—— 大病毒 和包涵体 （三） 检测病毒特异性IgM抗体 检测病毒特异性IgM抗体可诊断急性感染或证明病毒复制。 （四） 检测病毒核酸 1 核酸杂交 ?? 斑点杂交（dot hybridization） ?? 原位杂交（in site hybridization） ?? DNA印迹杂交（Southern blot） ?? RNA印迹杂交 （northern blot） 2 核酸扩增 聚合酶链反应 （polymerase chain reaction，PCR DNA） 连接酶链反应（ligase chain reaction，LCR） 反转录PCR（Reverse transcrptase PCR，RT—PCR (RNA) 3 基因芯片技术（gene chip） 第二节 病毒感染的特异性预防 一、人工主动免疫 1、灭活疫苗 2、活疫苗 3、重组载体疫苗 4、亚单位疫苗 二、人工被动免疫 1、免疫球蛋白 2、细胞免疫制剂 第三节 病毒感染的治疗 药物治疗 核苷类药物——抑制病毒基因复制 ——抑制病毒基因转录 蛋白酶抑制剂 天然药物（中草药） 其他药物（金刚烷胺） 干扰素及干扰素诱生剂治疗 基因治疗（反义寡核苷酸、抑制病毒复制） 免疫治疗（特异性抗体、免疫调节剂、治疗性疫苗等 * 课件 课件 一 标本的采集与送检（principle of collection specimen） 1、采集急性期标本 2 、污染标本应用抗生素抑制标本中细菌或真菌的生长 3 、低温保存，快速送检 4、 血清学实验检查抗体（双分血清） 课件 课件 课件 正常细胞 病变细胞 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 课件 （二）检测病毒蛋白抗原 用已知特异性抗体直接检测病毒蛋白抗原（简便、敏感、特异） 常用方法：免疫荧光技术（IF） 固相放射免疫测定（SPRIT） 酶免疫技术（EIA）等。 课件 课件 课件 课件 * * *