小鼠心梗模型制备及其心功能检测.ppt

医学研究中实验动物的伦理原则—“3R”原则 减少（Reduction） 代替（Replacement） 优化（Refinement） 减少动物实验中的应激因素 建造自然舒适的环境 有躲避的安全场所（设置黑洞） 实验中的动物爱护 清洁与玩耍 熟悉动物的生物学特性、进行正确的实验操作，减少动物痛苦 正确的抓取与固定，让动物舒适、有安全感 大动物：其解剖结构、心脏血管分布和心脏/体重比等方面与人的心脏很相似。试验周期长、成本高、操作难度大。 小动物：繁殖快易饲养、试验周期短，成本低小鼠生命力相对弱，手术耐受性差，术后评估效果相对难。 选择小鼠作为心梗模型可以大大降低成本，缩短实验周期，有利于实验的重复性和数据的稳定性，对于研究人类心肌梗死的发生，发展及转归具有重要价值。 开胸 沿着胸骨左缘自下而上切开皮肤约1.5cm，剪开或者分立胸大肌，暴露第四肋间，切开肋间约1.0cm,用微型拉钩（retractor）分离肋骨，暴露心脏。用弯钳提起心包膜，用有齿镊子轻轻的撕裂开心包膜，暴露出心脏，找到左心耳，确定前降支。 结扎 用8.0线结扎左前降支后，退出分离器，用6号线缝合肌肉层，4号线缝合皮肤。停止麻醉，脱离呼吸机，一旦确信小鼠有自主呼吸，就可以拔管。随后可皮下注射无菌生理盐水0.5ml。将小鼠放置在暖水袋上保持约1小时后放回动物房。 验证结果：最直接的是心电图 1) Staining: Evan’s Blue dye and TTC after MI or I/R . 2) Calculate the area at risk . Jitka A.I.?Virag et al.J Journal of Visualized Experiments2011 1-5 Cross section:Evans blue dye (Blue), TTC staining of metabolically viable tissue (red). Necrotic areas do not stain ( pale) A. K. M. Tarikuz Zaman et al.J Exp Biol Med (Maywood) 2009 234: 246 超声心动图 PV-Loop 心梗模型的心功能检测 超声心动图是应用超声波回声探查心脏和大血管以获取有关信息的一组无创性检查方法。包括M型超声、二维超声 、彩色多普勒血流显像等。 * 小鼠心梗模型的制备及其心功能检测 动物拥有生存，享受生命，免受痛苦权利 动物权利 简介 在心血管疾病研究中，心肌梗死动物模型的建立对于研究冠心病、心力衰竭等疾病的病理生理变化、心电生理改变、评价各种治疗方法以及预防冠心病的发生发展具有重大价值。今天，与大家一起讨论小鼠心肌梗死模型的制备及其心功能的检测。 对动物模型的要求 如何建立具有稳定性高，重复性好的心肌梗死模型对于心肌梗死的基础研究有着重要的应用价值。 心梗模型制备 一、器械准备 1.麻醉机 2.呼吸仪 3.显微镜 4.保温垫 5.洁净手术台 6.显微手术器械 二、小鼠准备 小鼠年龄：﹥6w 体重：﹥18g 三、术前准备 器械消毒 动物麻醉 异氟醚 当小鼠对痛觉没有反应时，可将润滑剂涂抹在小鼠的双眼上以免干燥，脱去颈部、胸部的体毛。 手术步骤 用75%酒精或温水清洗掉体毛，然后用75%酒精消毒手术视野。将小鼠固定在暖垫上，然后用粘胶固定四肢。用粗线牵拉上齿固定。 切开颈部皮肤，分离皮下组织和肌肉，露出气管。牵拉舌头，利用PE tubing(20号)进行气管插管，插好后连接好呼吸机。 麻醉机调节 Isofluran：2 ? 氧流量：2 呼吸机调节 呼吸频率(Respiratory Rate)：30 to 350 μl ? 输出量(stroke volume)：0-130ul