Western Blot技术学习和交流.pptx

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Western Blot技术学习和交流

2012-4-20;; ; ;Blotting技术; ;1.准备;;;2.蛋白样品的制备;;样品蛋白的定量(BCA法);;3.SDS;;;制胶;上样;电泳;5.转膜;半干法 简单方便,时间短,适合小分子蛋白,10-60min 湿转法 稳定、效果好,适合大分子蛋白,45min-2h ;转膜准备;制作“三明治”;转膜条件: 300mA,45min——2小时;根据蛋白大小以及胶厚度的不同而不同。;5.转膜后检测(丽春红染色);6.封闭 ;;7.免疫反应;;8.显色(结果检测);9.分析;;;常见问题分析;背景高;条带位置不对

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