十维生素的测定课件.ppt

维生素都具有以下共同特点： 这些化合物或其前体化合物都在天然食物中存在； 作为辅酶的成份调节代谢过程，需要量极小； 它们一般在体内不能合成，或合成量不能满足生理需要，必须经常从食物中摄取； 长期缺乏任何一种维生素都会导致相应的疾病。 根据溶解特性，维生素可分两大类： 脂溶性维生素（A、D、E、K） 水溶性维生素（B族、C） 第二节 脂溶性维生素的测定 脂溶性维生素具有以下理化性质： 1. 溶解性：脂溶性维生素不溶于水，易溶于脂 肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。 2. 耐酸碱性： 维生素A、D对酸不稳定， 对碱稳定， 维生素E对酸稳定、对碱不稳定，但在抗氧化 剂存在下或惰性气体保护下，也能经受碱的煮 沸。 一、维生素A的测定 （一） 概述 主要来源于： 肝脏、鱼干油、蛋类、乳类等动物性食品中 植物性食品中不合VA，但在深色果蔬中含有 胡萝卜素，它在人体内可转变为VA，故称为 VA原。 VA的测定方法： 三氯化锑比色法 紫外分光光度法 荧光法 气相色谱 高效液相色谱 （二）三氯化锑比色法 1.原理 在氯仿溶液中，VA与三氯化锑可生成蓝色 可溶性络合物，在 620 nm 波长处有最大吸 收峰，其吸光度与VA的含量在一定的范围 内成正比，故可比色测定。 2. 适用范围及特点 本法适用于维生素A含量较高的各种样品 (高于 5~10μg／g)，对低含量样品，因 受其它脂溶性物质的干扰，不易比色测定。 该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳 定性差。比色测定必须在 6秒钟内完成， 否则蓝色会迅速消退，将造成极大误差。 3.测定方法 （1）样品处理 皂化 提取 洗涤 浓缩 5.说明及讨论 （1）乙醚为溶剂的萃取体系，易发生乳化现 象。在提取，洗涤操作中，不要用力过猛，若发生乳化，可加几滴乙醇破乳。 （2） 所用氯仿中不含有水分，因三氯化锑遇水会 出现沉淀，干扰比色测定。 故在每ml氯仿中应加入乙酸酐1滴，以保证脱水。 （3）由于三氯化锑与维生素A所产生的蓝色物质很不稳定，通常6s以后便开始褪色，因此要求反应在比色杯中进行，产生蓝色后立即读取吸光值。 （4）维生素A见光易分解，整个实验应在暗处进行，防止阳光照射，或采用棕色玻璃避光。 （5）测定结果也可以每100g食品中所含维生素A的国际单位表示，每国际单位维生素A相当于0.3μg维生素A。 （6）如果样品中含β-胡萝卜素干扰测定，可 将浓缩蒸干的样品用正己烷溶解，以氧化铝为吸附剂，丙酮-己烷混合液为洗脱剂进行柱层析。 （7）三氯化锑腐蚀性强，不能沾在收上；三氯化锑遇水生成白色沉淀，因此用过的仪器要先用稀盐酸浸泡后再清洗。 二、维生素D的测定 维生素D 的测定方法有： 比色法 灵敏度高但操作复杂，费时。 气相色谱法 操作简单精密度高，灵敏度低 液相色谱法 灵敏度高、操作简便，精度高，分 析速度快 薄层层析法 紫外分光光度法 第三节 水溶性维生素的测定 性质 易溶于水，而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多 数有机溶剂 在酸性介质中很稳定，即使加热也不破坏； 在碱性介质中不稳定，特别是在碱性条件下 加热。 维生素B2对光，特别是紫外线敏感，易被光 线破坏；VC对氧、铜离子敏感，易被氧化。 VC通常采用草酸、草酸-醋酸、偏磷酸-醋酸溶液直接提取。 草酸价廉，使用方便，对VC有很好的稳定性能； 偏磷酸本身不稳定，与水结合逐渐变成磷酸，只能保存7~10天，且价格较贵，溶解费时，但它能沉淀蛋白质，澄清提取液，适合于蛋白质含量较高的样品。 一、维生素B1的测定 VB1又名硫胺素 VB1的存在形式：游离态或焦磷酸酯 VB1主要存在于酵母、米糠、麦胚、花生、 黄豆 以及绿色蔬菜和牛乳、蛋黄中。 测定维生素的方法 比色法 荧光法 高效液相色谱法 1. 原 理 硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成硫色素（吡哆色素） ，在紫外光照射下，硫色素发 出蓝色荧光，在给