猪进行性萎缩性鼻炎课件.ppt

猪进行性萎缩性鼻炎 内容简介: 猪进行性萎缩性鼻炎的病原 症状及危害 诊断方法 预防与治疗 猪进行性萎缩性鼻炎的病原 猪进行性萎缩性鼻炎(PAR)是世界公认的危害集约化养猪生产的重要疾病之一 ,该病由产毒性多杀性巴氏杆菌(toxigenic Pasteurella multocida,T＋Pm)单独感染或与Bb (支气管败血波氏杆菌 )共感染所致。 长期以来,人们一直以为Bb是猪萎缩性鼻炎的致病因子,但后来发现该菌的分离率及其血清学检测与AR关系并不大。虽然感染Bb的猪可能引起鼻甲骨的严重损伤,但出栏前鼻甲骨又可获得恢复。然而, T＋Pm菌株单独或和Bb共同可引起鼻甲骨不可逆转的损伤。所以,人们逐渐认识到T＋Pm才是PAR的最主要致病因子。 Pm的产毒素菌株多为D型,少数A型Pm菌株也可产毒素。我国已有T＋Pm菌株的流行。 T＋Pm与非产毒素多杀性巴氏杆菌(non-toxigenic Pasteurella multocida, T-Pm)在形态特征及生化反应特性上没有明显区别。但T-Pm不含toxA基因,不能导致进行性萎缩性鼻炎。有无toxA基因是两种菌的根本区别。 T＋Pm分泌一种约146kDa的皮肤坏死毒素(PMT) ,该毒素由toxA基因编码,是T+Pm的主要致病因子。 1986年Dominic等人用少量提纯的毒素就复制出本病,有力的证明了PMT是T＋Pm的主要致病因子. PAR的症状及危害 猪萎缩性鼻炎的临床症状表现为打喷嚏、鼻塞、鼻衄、颜面部变形或歪斜,病猪生长发育缓慢 。另外,患猪由于鼻泪管阻塞,泪液流出眼外,在眼内眦下皮肤上形成弯月形的湿润区,被尘土沾污后形成灰黑色痕迹,称为“泪斑”。 危害:猪厂一旦被产毒素多杀性巴氏杆菌污染,很难净化。 患PAR 的猪鼻甲骨变形、萎缩或消失 ,发育迟缓、饲料转化效率降低 ,对其它病原的易感性强 ,从而使养猪业造成巨大经济损失 。 PAR的诊断方法 细菌学方法 :常用方法通过尸体剖检和活体拭子中分离鉴定多杀性巴氏杆菌进行诊断。 免疫学方法: Forged(1988)等最先使用单克隆抗体检测初代分离培养基中细菌混合物所产生的毒素。以两种不同的鼠抗Pm毒素单克隆抗体P3F51和P3F37为基础建立的夹心ELISA检测Pm。目前,已有商品化DAKO PMT-ELISA -Kit(K0009)和DAKO ELISA-Kit(K0038)分别用于检测毒素和血清及初乳中抗毒素抗体,可用于区分带菌猪及预防传播。 PAR的诊断方法 分子生物学检测技术:Kamps(1990)用亚克隆的方法获得5个DNA探针,这5个探针覆盖了全部的toxA基因,用来检测DNA片断。 1991年,Magyar等用过氧化物标记的单克隆抗体在尼龙膜上进行菌落原位杂交。该方法特异性好,可以用于检测初级培养物的菌落。 自1994年Nagai首次报道用PCR的方法检测T＋Pm以来,人们已建立了多种T＋Pm 的PCR检测方法,包括多重PCR、巢式PCR。PCR法灵敏性高,特异性强。 PAR的诊断方法 X-射线诊断法: 根据有关材料报道,X射线诊断法比细菌学和血清学检查具有更高的阳性检出率和较大的诊断准确性. X射线检查或照相时,可将胶片贴在病畜的硬腭上,从鼻背部向 鼻腔投照,相片上可显示出鼻甲骨和黏膜的改变. 预防与治疗 猪萎缩性鼻炎的疫苗: 最初,AR的疫苗为Bb单苗。随着人们对该病认识的不断加深,制成了加有T+Pm或/和其类毒素的联苗。 类毒素具有免疫原性。相关研究表明,纯类毒素与粗类毒素的免疫原性差异显著。用天然毒素PMT攻击时,前者免疫的猪可完全得到保护,而用后者免疫的猪只有部分得到了保护,并证实来自不同型菌株的类毒素具有交叉免疫性,抗毒素虽然能大大降低T+Pm在鼻腔内的定居及繁殖,但并不能消除其感染。 预防与治疗 实验证实,Bb菌苗中加有D型T+Pm提纯类毒素的联苗效果最好,而且该联苗对A型T+Pm菌株的攻击也同样具有保护作用。 目前,科研工作者已克隆了toxA基因片段 ,转化大肠杆菌BL21(DE3) 诱导表达 ,检测表明,表达蛋白具有良好的生物学活性,为研制猪进行性萎缩性鼻炎新型基因工程疫苗奠定了基础 。 免疫程序 猪传染性萎缩性鼻炎-猪多杀巴氏杆菌二联灭活苗, 对妊娠母猪及仔猪进行免疫预防,可 获得较理想的保护效果。 可以推荐的免疫程序为: ①妊娠母猪产前 40 d、25 d 各肌肉注射蜂胶苗 2. 0m l/头; ②仔猪于1 周龄、4 周龄各颈部肌注接种2.