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儿童川崎病急性期淋巴细胞亚群变化与意义 　　【摘要】 目的：观察川崎病儿童急性期外周血淋巴细胞亚群的变化，以探讨儿童川崎病的发病机制。方法：选择在本院最终确诊为川崎病的219例患儿作回顾性分析，106例健康体检儿童作为对照组，应用流式细胞术检测川崎病患儿治疗前及健康对照组儿童外周血淋巴细胞亚群CD3+细胞、CD3+ CD4+细胞、CD3+CD8+细胞 、CD16+ CD56+细胞、CD19+细胞的百分率以及CD4+/CD8+的比值。结果：与健康对照组相比，川崎病患儿外周血CD19+细胞的百分率、CD4+/CD8+比值均明显升高（P 　　【关键词】 黏膜皮肤淋巴结综合征； 淋巴细胞亚群 　　川崎病（Kawasaki disease，KD）又名皮肤黏膜淋巴结综合征，是一种儿童常见的血管炎综合征，目前其已取代风湿热成为儿童后天性心脏病的主要原因，但川崎病的发病机制至今尚不明确。目前多认为本病是在一定遗传学背景下由感染触发的免疫性血管炎[1-2]。免疫学??异常在其发病中至关重要，目前关于T细胞、B细胞、自然杀伤细胞（NK cells）等在川崎病急性期的改变情况各种研究结果很不一致。本研究旨在通过回顾性分析较大样本的川崎病患儿急性期外周血淋巴细胞亚群的变化，来探究这些细胞亚群在川崎病发病机制中的可能作用。并为临床上诊断川崎病提供一个基于免疫学角度去评价患儿疾病状态的方法，初步探讨如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 研究对象为2010年8月-2012年8月在本院住院治疗的219例川崎病患儿，男140例，女79例，年龄2个月～9岁，平均年龄（27.0±22.5）月。诊断标准参照文献及《Nelson Textbook of Pediatrics》19版[3-4]。所有患儿均在入院当天未行丙种球蛋白等治疗前采血（均在病程10 d内）。本院同期体检的106例健康儿童作为健康对照组，男70例，女36例，年龄4个月～10岁，平均年龄（30.0±21.4）月。两组年龄、性别等一般资料差异无统计学意义（P0.05），家长均知情同意。 　　1.2 检测方法 取清晨空腹静脉血2 mL，用乙二胺四乙酸（EDTA）钾盐抗凝，各取100 μL，分别加CD3-化青素（Cy5）、CD4-异硫氰酸荧光素（FITC）、CD8-藻红蛋白（PE）、CDl9-APC、CDl6CD56-藻红蛋白荧光抗体各15 μL，对照管加同型荧光标记的鼠抗人IgG，放置室温避光孵育15～20 min，加溶血素500μL溶血10 min，用0.01 mol/L、pH 7.4的PBS洗涤（1500 r/min， 5 min）2次后，应用美国Beckman Coulter公司Epics XL-MCL型流式细胞仪进行测定。 　　1.3 统计学处理 应用SPSS 19.0统计软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组间比较采用2个独立样本的t检验，率的比较采用 字2检验，P 　　CD4+与CD8+细胞的平衡在维持免疫稳态中起着重要作用，CD4+细胞可以促进免疫反应，而CD8+细胞则可抑制免疫反应。一般情况下，CD4+/CD8+比值维持一定的动态平衡，保持机体免疫功能稳定，如果CD4+/CD8+比值发生改变，则引起免疫功能的紊乱。本研究结果显示川崎病患儿在急性期CD4+/CD8+比值明显增高，提示这可能导致机体的免疫调节失衡，从而导致免疫损伤，参与川崎病的发病。 　　在本研究中，笔者发现川崎病急性期CD8+细胞也明显减少，提示CD8+细胞也参与川崎病的发病，CD8+细胞作为具有免疫抑制效应的细胞，其减少可导致免疫的过度激活，同时也导致CD4+/CD8+比值升高，加剧免疫调节的失衡，从而参与川崎病的免疫损伤，另外，尚有研究发现在川崎病患者血管壁中有CD8+细胞浸润，这或是川崎病患儿外周血CD8+细胞下降的一个重要原因[8]。 　　CDl6+CD56+是NK细胞的标志物，NK细胞具有一定的免疫调节功能，有研究发现川崎病患儿急性期NK细胞的百分率及绝对值均降低[5]。本研究结果也显示川崎病患儿外周血中NK细胞百分率较健康对照组明显降低，提示NK细胞也参与了川崎病的发病，NK细胞的降低可能导致对B细胞增殖和分化的抑制减弱，从而引起B细胞过度增殖。当然，NK细胞的下降可能与其浸润至炎症部位也有一定关系[5]。新近的一项研究表明在川崎病急性期，外周血CDl6+CD56+及CD8+细胞均明显下降，且这些细胞表面表达的NKG2D也明显下降，NKG2D是在一种C型凝集素样Ⅱ型跨膜糖蛋白，在生理状态下，其可以通过增强CD16+CD56+及CD8+细胞的杀伤作用来调节免疫，NKG2D在川崎病患儿急性期的低表达可能会导致免疫的失衡，从而参与发病[9]。 　　既往的观点以及目前也