仪器分析课件第18章色谱法导论.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * 例2：用3m长的填充柱得到如图所示的色谱流出曲线，为了得到R＝1.5的分离度，填充柱最短需要多少米? 例3：已知一色谱柱在某温度下的速率方程的A=0.08cm；B=0.65cm2/s; C=0.003s, 求最佳线速度u和最小塔板高H。 解：欲求 u最佳和H最小,要对速率方程微分,即 dH/du＝d(A+B/u+Cu)/du ＝-B/u2+C＝0 而,最佳线速: u最佳＝(B/C)1/2 最小板高: H最小＝A+2(BC)1/2 可得 u最佳＝(0.65/0.003)1/2＝14.7cm/s H最小＝0.08+2(0.65×0.003)1/2＝0.1683cm 色谱定性和定量分析 一、定性分析 （一）利用纯物质对照定性 （二）相对保留值法 （三）加入已知物增加峰高法 （四）保留指数定性法 （五）其它方法 如红外光谱法（IR）、质谱法（MS）、核磁共振波谱法（NMR）等结合进行定性鉴定。 （一）利用纯物质对照定性 在一定色谱条件下，一个未知物只有一个确定的保留时间。将已知纯物质在相同条件下的保留时间与未知物保留时间进行比较，就可定性鉴定。相同，未知物可能是已知的纯物质；不同，未知物就不是该纯物质。 纯物质对照法定性只适用于组分性质已有所了解，组成比较简单，且有纯物质的未知物。 是气相色谱定性中最常用的定性方法。 由于两种组分在同一色谱柱上可能有相同的保留值，只用一根色谱定性，结果不可靠。可采用另一根极性不同的色谱柱进行定性，比较未知组分和已知纯物质在两根色谱柱上的保留值，如果都具有相同的保留值，即可认为未知组分与已知纯物质为同一种物质。 （二）相对保留值法 对于一些组成比较简单的已知范围的混合物或无已知物时，可选定一基准物按文献报道的色谱条件进行实验，计算两组分的相对保留值： 并与文献值比较，若二者相同，则可认为是同一物质。（ris仅随固定液及柱温变化而变化。） 可选用易于得到的纯品，而且与被分析组分的保留值相近的物质作基准物。 （三）加入已知物增加峰高法 当未知样品中组分较多，所得色谱过密，不易辨认时，或仅作未知样品指定项目分析时均可用此法。首先作出未知样品的色谱图，然后在未知样品中加入某已知物，又得一色谱图。峰高的增加的组分即可能为这种已知物。 （四）保留指数定性法 保留指数（retention index） 又称柯瓦指数。它表示物质在固定液上的保留值行为，是国际上公认的定性指针。重现性好、标准统一及温度系数小。 保留指数的物理意义在于：它是与被测物质具有相同调整保留时间的假想的正构烷烃的碳数乘以100。保留指数仅与固定相的性质、柱温有关，与其它实验条件无关。其准确度和重现性都很好。 IX为待测组分的保留指数，z与 z+n 为正构烷烃对的碳数。规定正己烷、正庚烷及正辛烷等的保留指数为600、700、800，其它类推。 在有关文献给定的操作条件下，将选定的标准和待测组分混合后进行色谱实验（要求被测组分的保留值在两个相邻的正构烷烃的保留值之间）。由上式计算则待测组分X的保留指数IX，再与文献值对照，即可定性。 例：在15%OV-17柱上(柱温105℃)测得甲烷tM=3.0mm，正壬烷 的tR=30mm，正癸烷 的tR=58mm； 与 峰宽相同，均等于4.8mm。求能与 达到基线分离的组分的保留指数应为多少？ 解： 未知组分定位于 与 出峰，由 先求出 i 组分调整保留时间 值 故可得 二、定量分析 式中 为被测组分i的质量， 为被测组分i的峰面积， 为被测组分i的校正因子。 （一）峰面积的测量 1、峰高乘半峰宽法当峰形对称，即流出曲线呈高斯正态分布时，理论上已证明峰面积A为 2、峰高乘平均峰宽法 不对称峰面积可以用峰高乘平均峰宽法来计算峰面积。在峰高0.15及0.85处分别测量峰宽度，取其平均值，再与峰高相乘，近似计算峰面积。 （二）校正因子 同一检测器对不同物质的响应值不同，当相同质量的不同物质通过检测器时，产生的峰面积（或峰高）不一定相等。为使峰面积能够