《细菌质量控制》ppt课件.ppt

临床细菌室应该建立室内质控的标准操作程序（SOP）文件以及保证该SOP文件得以严格执行：要有的放失地进行室内质控工作， 实验室应严格对室内质控结果进行记录，未了便于操作，最好设计出简便合理的记录表格。对于任何一项室内质控均给出明确的质控预期结果，以便判断室内质控结果是否合格。针对失控，需建立失控处理程序，失控处理最后应填写失控报告备案。 应认真学习好NCCLS颁布的有关纸片扩散法试验时应注意的问题，应严格按照NCCLS颁布的标准来判定敏感和耐药，如对于耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌 * 的MRS株，头孢菌素类和其他β-内酰胺类如阿莫西林/克拉维酸，氨苄西林/舒巴坦等和亚胺培南等可在体外显示活性，但临床无效，因此仍报告临床耐药。从血液和脑脊液分离的肺炎链球菌,应用MIC法测试并报告青霉素，头孢噻肟或头孢曲松,美罗培南和万古霉素的敏感性。对其他部位的分离株则用苯唑西林纸片筛选试验，如果抑菌环=19mm应测试青霉素和头孢噻肟或头孢曲松的MIC。对于肠球菌，头孢菌素类，氨基糖苷类，克林霉素和TMP/SMZ在体外可能有活性，但临床上无效，因此不报告细菌对这些药物敏感。对于沙门菌属和志贺菌属分离株，1代和2代头孢菌素在体外可能表现对于沙门菌属和志贺菌属有活性，但临床无效，故不应报告为敏感等等。 * 室间质量控制方法： 重点是冻干菌株的复活。冻干菌株一般用无菌盐水或肉汤溶解即可，接种时先接种一个血平板和一个选择性培养基，另外还要做增菌培养，用营养肉汤或牛心浸液都可以. 革兰染色、分离鉴定： 当菌株被分离出来，应先进行革兰染色。革兰染色是细菌鉴定的关键之一，为防止错判染色结果，导致错误的鉴定方向，可用新鲜的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌标准菌株与待检菌株放在同一玻璃片上，以确保待检菌株染色结果的真实性.同时还应做3%KOH拉丝试验，待检菌拉丝试验阳性为革兰阴性杆菌. * 分支杆菌为强抗酸菌，用1%盐酸酒精脱色，而怒卡菌为弱抗酸菌则用1%硫酸酒精脱色。分支杆菌的涂片包括金胺-罗丹明法和妻-尼法。金胺-罗丹明法阳性后，要用妻-尼法确证。实验室要掌握多种染色方法，以防漏检. * 分离鉴定： 当菌株被分离出来后，就要坚持正确鉴定程序，这一点对能否将质控菌株做出正确鉴定至关重要。可按操作规程方法进行鉴定，也可采用数字编码方法。做好菌株的鉴定。还要掌握一些关键性试验，如：动力试验，氧化酶试验，触酶试验，耐盐试验，O/F试验，吲哚试验，苯丙氨酸托氨酶试验，CAMP试验，硫化氢试验。4℃，22℃，44℃及CO2生长试验等。还应掌握不常见菌的关键性鉴定，如产单核细胞李斯特菌22℃-25℃有动力，37℃无动力，在血平板上形成较小的狭窄β溶血环的菌落，触酶阳性，CAMP试验阳性。 * 小肠结肠炎耶尔森菌耐低温，4℃-40℃均能生长，37℃时阴性。嗜麦芽窄食单胞菌，氧化酶阴性，DNA酶阳性，赖氨酸脱羧酶阳性，七叶苷阳性，在麦康凯平皿上的菌落无色或不扩散的淡黄色色素等等。我们不但要掌握这关键性试验，还应了解某些细菌所具有特性，还能以灵活组合的方式用于细菌鉴定。虽然实验室的试剂完备和鉴定仪器等对做好质控有很大帮助，但是检验人员的基础知识，基本技术掌握的水平也是很重要的。对培养基的选择，分离技术，（在先进的仪器也需要提供纯的菌落才能鉴定）操作步骤是否正确，对结果的判定和解释都十分重要。如果这些掌握不好，用仪器也会鉴定错误。 * 注意事项： 校正好室内质控物，才能保证室间质控 尽量使收到的冻干菌株存活 要坚持正确的鉴定程序 认真填写好回报单（菌名、革兰染色、 仪器、 试剂、主要生化鉴定） 细菌室的工作需要室间质控来评估，室间质控不仅仅是简单的考核，而是用必威体育精装版的知识来教育提高细