医械生物学评价实验ppt课件.ppt

* 体外细胞毒性试验具有通用性, 广泛适用于各种医疗器械和材料的评价。因此，ISO 10993的本部分的目的不是规定一个单一的试验方法，而是规定一个试验方案，需要在一系列试验步骤中判断。在这四种类型中，每一类都有几种可供选择的方法，研究者宜了解试验的分类及其相应的专项技术，以便可以与其他类似器械或材料的结果在实验室内部和各实验室间的水平上具有可比性。附录中给出了定量试验方法举例。 ISO 10993的本部分还给出了试验结果的解释指南 ?生物相容性评价的依据和方法 ?产品所用材料的描述及与人体接触的性 质 ?实施或豁免生物学试验的理由和论证 ?对于现有数据或试验结果的评价 评价报告中涉及的生物学试验项目提供详细试验报告 生物学试验机构资质 生物学试验应当委托具有医疗器械检验资质认定、在其承检范围之内的生物学实验室按照相关标准进行试验。国外实验室出具的生物学试验报告，应附有国外实验室表明其符合GLP实验室要求的质量保证文件。（食药监械管[2015]247号） * 试验样品的选择和制备标准化是保证生物学评价试验结果可靠性和可比性的很关键的一步。因此医疗器械在按照ISO10993其它部分规定的生物学系统进行试验时，要遵循样品制备和参照样品的选择的原则。 有些医疗器械生物学评价试验可以直接用材料作试验样品，例如各种类型的电极、体外假体、固定带、压迫绷带、监测器、磁疗贴、退热贴、痛经贴等进行皮肤刺激和致敏等试验。但有些生物学评价试验必须用试验样品浸提液例如全身急性毒性、细胞毒性等试验，有些医疗器械例如一次性使用输液器、输血器、注射器等必须用浸提液做试验。同时医疗器械种类繁多，形状各异、并且大多数医疗器械不能在溶剂中溶解，对生物学评价试验的试验样品选择和制备的标准化带来很大难度，但试验样品的选择和制备标准化是保证生物学评价试验结果可靠性和可比性很关键的一步。因此医疗器械在按照GB/T16886其它部分规定的生物学系统进行试验时，要遵循样品制备和参照样品的选择的原则。 * 由于完整表面与切割表面存在潜在的浸提性能差异， 因此对于弹性体、涂层材料、复合材料、层状薄片等应尽量完整地进行试验。 * 可不可以采用其他条件进行浸提呢？可以，可采用其他模拟临床使用或能对潜在危害进行适当检测的条件，但应加以说明并阐述理由。 * 加严浸提：任何预期会导致化学成分溶出量大于模拟使用条件下溶出量的浸提。但加严浸提预期不会导致材料的化学改变或某些物质溶出。 这样聚合物溶出的游离单体总量将减少；而这些降解产物在成品器械使用条件下是找不到的。 因为浸提温度超过（37±1）℃会对血清化学和/或血清稳定性以及培养基中其他成分产生不良影响。 对聚合物试验样品，由于高温会改变溶出物成分，浸提温度不宜超过材料玻璃化温度。 * 对短期（累积接触时间不大于4h）与未受损皮肤或黏膜接触并且是非植入的器械，在a)至c)所给条件下，浸提时间可小于24h但不小于4h。 注意吸胀材料的浸提方法。 * 聚合物宜切成10mm×50mm或5mm×25mm的小块。 * 对一般产品来说，含血清培养基是细胞毒性首选的浸提介质，优先选用含血清培养基用于浸提是由于其具有支持细胞生长以及浸提极性和非极性两种物质的能力。 * 浸提应在搅拌的条件下进行。当认为静态适宜时，应对试验方法加以论证、规定并出具报告。也就是说若需要搅拌后影响试验，需要静置取上清时，一定要说明。 浸提液不能存放超过24h, 否则应确认贮存条件下浸提液的稳定性和均一性。 * 修改了“材料浸提液的制备”、“试验步骤”“结果评价”等相关内容，给出了细胞毒性定性和定量评价指标；增加了细胞毒性四个定量试验的具体方法 * (1) 细胞形态学评价：供试品导致细胞损伤发生形态改变和细胞破坏，通过显微镜下直接观察, 可看到细胞受损后出现皱缩, 变圆，溶解和崩解等现象，这是一种定性检测方法，结果评价相对比较初浅，通常仅作为一种辅助或补充的方法。 (2) 细胞膜效应评价：以生物膜效应为评价细胞反应的指标，通过染色来鉴别存活细胞与死亡细胞，并对细胞损伤程度进行测定。该方法显然比单纯观察细胞形态方法更客观，这类方法包括中性红染色法，台盼兰染色法，荧光素染色法以及51Cr释放法等。 (3) 细胞生长能力评价：通过测定供试品与细胞接触后细胞生长速度的改变，可以定量评价供试品对细胞正常生长能力的影响。该类方法包括细胞增殖度测定。 (4) 细胞代谢特性评价：通过定量检测细胞生物代谢活性或生物合成功能的改变，评价供试品的细胞损伤作用。其中包括有ＭＴＴ法、各种测定细胞总蛋白量，蛋白质合成率和酶活性的方法。 * (1) 浸提液方式：浸体液试验是将供试品浸泡在规定的介质溶液中，经过一定的时间和温度的作用，取其浸提