瘦肉精对神经性肌肉萎缩的治疗作用课件.ppt

两个关键词 瘦肉精 肌肉萎缩 瘦肉精,学名盐酸克伦特罗，是一种人工合成的β?肾上腺素，分子式C12H18Cl2N2OHCl 选择作用于β?肾上腺素受体，激活ＣＡＭＰ，加速脂肪分解，促进蛋白合成,在饲料中添加一定量瘦肉精，可使动物瘦肉率增加，改善肉质.但使用过多常引起中毒事件，本实验拟探究瘦肉精对神经性肌肉萎缩的抑制作用，以期望发挥其有利用途． 背景 “瘦肉精”中的化学成分在医学临床上可以治疗哮喘，国际上也有一些运动员非法服用该药以提高肌肉力量。20世纪80年代初，美国一家公司开始将其添加到饲料中，增加瘦肉率。由于人食用了添加“瘦肉精”的猪肉、猪肝后会引起心脏功能紊乱，我国已对其明令禁止。 神经肌肉萎缩 神经性肌肉萎缩是世界难题，目前医学界无可奈何 目前西医治疗重症肌无力多采用口服激素类药物治疗，如新斯的明，强的松等，只能维持或缓解暂时现状，且副作用明显。另外是胸腺切除术。手术后临床观察，胸腺摘出后，半年内病情可能有所波动，甚至加重，但1-2年后，病情渐趋平稳，5年后约90%有效。 传统治疗肌肉萎缩的方法主要包括注射生长激素等以提高肌肉质量，但在肌肉质量不断加大的同时，肌肉细胞数量也在不断增长，有可能导致细胞分裂失控、混乱扩散从而引发肿瘤。 目的 　探究瘦肉精对大鼠肌肉萎缩的治疗作用，以发挥其有利药理作用． 【实验步骤】　 一 制备大鼠坐骨神经离断损伤模型　 二 灌服盐酸克伦特罗 三 制片和观察 对A组大鼠予以1ml配好的盐酸克伦特罗片溶液灌胃，作好标记，B组大鼠不予处理 a 分别对两组大鼠腹腔注射20%乌拉坦麻醉（0.65ml/100g）,固定于大鼠手术台 b 由股外侧肌间隙进入，暴露左侧坐骨神经，并完全切除（取出约1mm一小段），右侧不作处理 c 局部注射青霉素，缝合伤口，表面涂上碘酊，腹腔注射1ml配好的青霉素注射液 d 将术后大鼠放回鼠箱，正常喂食，等待苏醒 　 1） 待大鼠苏醒后，取12片演算克伦特罗片（40ug/g片）研磨成粉末，溶于5ml注射用葡萄糖溶液中备用，另将80万单位青霉素配成10ml青霉素钠液备用 2） 对实验组大鼠予上述盐酸克伦特罗溶液灌胃，1ml每只，对照组不灌胃 3） 对照组和实验组均给予腹腔注射青霉素钠液1ml每只，伤口处用碘酊消毒 4） 每次实验后都把大鼠放回笼中，添加足量正常饲料和水 5） 以后每天都按照上述方法给实验组大鼠灌胃，对照组不灌胃，然后给大鼠注射青霉素钠液和用碘酊给伤口消毒，时间总共为六天 1） 实验的第七天给实验组和对照组的每只大鼠均注射过量的乌拉坦麻醉致死，注射后很快就达到了预期效果 2） 将已麻醉致死的大鼠置于大鼠手术台，每只大鼠均取两侧腓肠肌，并将所取下的腓肠肌放进生理盐水中冲洗浸泡，然后再剪下适当的大小肌肉 3）在手术过程中要避开脂肪组织，所取肌肉大小尽量控制在1.5cm×1.5cm×（0.2~0.3Cm 4） 将所取肌肉氛围对照组和实验组装入编有号数的小试管中，并给予10%福儿马林固定24h，且固定液量为标本体积的5倍 5） 切片在二甲苯中脱蜡5～10分钟 6）移入二甲苯和纯酒精（1∶1）混合液中5分钟左右（如经二次二甲苯脱蜡，此步可略） 7）入100％、95％、85％、70％酒精，各级为2～5分钟。最后经蒸馏水转入染液 8）苏木精染液染色5～15分钟 9）水洗玻片上多余染液，0.5～1％盐酸酒精（70％酒精配制）分色片刻。镜检控制，直至细胞核及核内染色质清晰为止，约数10秒钟 10）流水冲洗15～30分钟，或者在碳酸锂饱和液中短时间碱化或蓝化，即细胞核呈蓝色。11）蒸馏水短洗 12）0.1～0.5％伊红染液染色1～5分钟，若着色困难，可在每100毫升染液中加入1～2滴冰醋酸，使易着色且不易脱色 13）依次经70％、85％、95％、100％酒精脱水，各级为2～3分钟，在95％以下浓度的酒精中伊红易脱色，应适当缩短时间 14）二甲苯透明（二次），共约10分钟 15）封片：擦去切片周围多余二甲苯，切勿干涸，迅速滴加适量中性树胶，再加盖玻片封固 16) 光镜下观察 实验结果与分析 1 在喂养的过程中，实验组大鼠的活跃程度明显不如对照组，大便较软，湿 讨论：由于盐酸克伦特罗极大地影响蛋白质，脂肪和肝脏中的代谢，并严重影响动物正常的生长发育，因此，实验组大鼠活跃程度降低及大便形状的改变可能是由瘦肉精的药物不良反应所致。另外，本实验的对照组大鼠并未予以灌胃处理，因此，实验组大鼠活跃程度减弱也可能是应激过度引起的。 2 手术切除大鼠两侧后腿腓肠肌制片过程中，可以肉眼观察及用手触及两组大鼠被切除坐骨神经一侧（左侧）肌肉明显萎缩，但两组萎缩程度未能肉眼区别。 讨论：坐骨神经被切断后，其支配的肌肉失去了神经的营养作用