机能学设计性实验苦瓜提取物对高血糖家兔的影响ppt课件.pptVIP

 苦瓜提取物对高血糖家兔的影响  机能学设计性实验 实验目的 学习设计实验的基本方法 学习给家兔灌胃给药的方法及一些基本的实验操作 了解糖尿病的危害、致病因素及治疗方法 糖尿病（diabetes）是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征。 实验原理 苦瓜含有多种降糖成分，主要有甾苷、皂甙、脑苷、生物碱及多肽类物质等。 降糖机制 抗自由基作用 类胰岛素作用 刺激B细胞分泌胰岛素 修复受损B细胞，改善其功能 影响葡萄糖代谢酶 实验动物 家兔，雌雄各半，体重2.0±0.2kg，50只（已制成Ⅱ型糖尿病模型，选血糖值≥11．1 mmol·L的动物作为高血糖模型），同期饲养的健康家兔10只，雌雄各半，遵义医学院动物实验中心提供。 主要仪器及主要试剂、药品 兔灌胃器、离心机、兔实验台、722型分光光度仪、D－101大孔吸附树脂柱等。 葡萄糖酶酚混合试剂、格列本脲、新鲜苦瓜、70％乙醇、90％乙醇等。 （一）、动物模型的制备 取质量(2.0±0.2)kg的健康家兔50只，正常饲料喂养1周后，耳静脉注射四氧嘧啶120 mg·kg～，72 h后耳后静脉取血(取血前禁食8 h)，测空腹血糖，选血糖值≥11．1 mmol·L叫的动物作为高血糖模型。 实验方案 （二）、家兔经口灌胃给药方法 把实验兔放在实验台上，用左手掌从头部握住兔头颈部，将其固定，用拇指和食指使劲压迫其口角部使口张开。然后，右手持抽好药液的灌胃器，用有弧度灌面从右口角处慢慢插入。 乙醇洗脱液 滤液 捣碎，用70%乙醇回流提取3次 脱色，滤过，滤液减压浓缩，得苦瓜提取物 D－101大孔吸附树脂柱，用水洗至无色，然后用90％乙醇洗脱 苦瓜提取物 苦瓜 苦瓜提取物的提取过程 高血糖模型家兔50只 家兔10只 不做处理 空白对 照组10只 大剂量 组10只 中剂量 组10只 小剂量 组10只 格列本 脲组10只 给药前、给药后1h、2h、3h、4h、5h采集血液样本 高血糖模型家兔50只 家兔10只 高血糖模型家兔50只 家兔10只 不做处理 高血糖模型家兔50只 家兔10只 空白对 照组10只 不做处理 高血糖模型家兔50只 家兔10只 大剂量 组10只 空白对 照组10只 不做处理 高血糖模型家兔50只 家兔10只 中剂量 组10只 大剂量 组10只 空白对 照组10只 不做处理 高血糖模型家兔50只 家兔10只 小剂量 组10只 中剂量 组10只 大剂量 组10只 空白对 照组10只 不做处理 高血糖模型家兔50只 家兔10只 生理盐水10ml/kg 灌胃给提取液300mg/kg 灌胃给提取液150mg/kg 灌胃给提取液75mg/kg 灌胃给格列本脲75mg/kg 测定各管的吸光度A 波长为：520nm 试剂与标本混匀后，在37℃水浴箱内静置10min 酶酚混合试剂3ml,加血清0.02ml 离心2000转/5min 血液样本 血清 血糖浓度＝A标本/A标准×标准液浓度（标准液为5mmol/L） 记录血糖值 组别 血糖值（mmol/L） 给药前 1h末 2h末 3h末 4h末 5h末 空白对照组 苦瓜小剂量组 苦瓜中剂量组 苦瓜大剂量组 格列本脲组 正常家兔组 各组血糖浓度值 根据实验结果可预测以下结论： 1、小剂量苦瓜提取液与优降糖比较，有降血糖效果。2、苦瓜提取液随着剂量的增加降血糖效果更加明显。 数据处理方法 以血糖浓度为统计量，结果采用SPSS统计软件进行组间χ2检验。 讨论 为什么选择苦瓜作为研究对象？ 为什么要选用家兔作为实验动物？