热源及内毒素综合培训ppt课件.ppt

2010版 2005版 10、与供试品接触的试验用器皿应无菌、无热原。去除热原通常采用干热灭菌法（250℃、加热30分钟），也可采用其他适宜的方法 试验用器的注射器、针头 及一切与供试品溶液接触 的器皿，应置烘箱中用250℃加热30分钟，也可采用其他适宜的方法除去热原 2010版 2005版 11、 3只家兔体温升高总和低于1.3℃ （三部未变，仍为1.4 ℃） 3只家兔体温升高总和低于1.4℃ 修订背景 １、热原实验是一个整体的动物实验，易受许多因素的影响。动物自身的行为、生理、外部环境以及一些实验过程等都可影响结果的准确性。 ２、对家兔体重取消了上限3.0kg，同时取消家兔使用次数不超过１０次的规定。 修订背景 ３、增加了升温达0.6 ℃的家兔应休息2 周以上新要求。 4、实验环境要求更加严格：实验室与饲养室温度相差由不大于 5 ℃改为3 ℃ 5、强调同组各家兔间温差不大于1 ℃，对家兔固定方式：宽松。 6、判定标准更加严格：初试的3只家兔体温升高总和低于 1.4 ℃改为低于1.3 ℃ 实验用兔灵敏度测试 每年不定期随机抽取体重和使用次数不同的实验用兔，按热原检查法要求注射５EU/kg或10EU/kg内毒素标准品，应得到不符合规定的结果。 热原检查适用性研究 新品种建立热原检查标准时，建议进行适用性研究，在不影响家兔正常生理的前提下，按人用每公斤体重每小时最大供试品剂量的２－５倍设定限值。（化学药品一般为２－３倍，中药为３－５倍）。 热原检查适用性研究 适用性试验时设三组：⑴限值剂量的供试品组⑵ 10EU/kg内毒素组⑶含10EU/kg内毒素的供试品组。 适用性试验判定： ⑴组符合规定， ⑵ 、⑶组不符合规定表明该品种可建立热原检查项。 14.细菌内毒素检查法 定义 2010版与2005版区别 修订背景 注射用药品、生物制品建立细菌内毒素检查法指导原则 细菌内毒素检查法 定义：本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰氏阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。 2010版与2005版区别 2010版 2005年版 1、细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.015EU/ml（用于凝胶法）或0.005EU/ml（用于光度测定法）且对内毒素试验无干扰作用的灭菌注射用水 凝胶法细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.015EU/ml的灭菌注射用水。光度测定法用的细菌内毒素检查用水，其内毒素的含量应小于0.005EU/ml 2010版 2005年版 2、常用干热灭菌法（250℃、30分钟以上）去除 常用的方法是在250 ℃干烤至少60分钟 3、 —— 或鲎试剂生产厂家推荐 4、内毒素限值按L=K/M计算，M为人用每公斤体重每小时的最大供试品剂量，以ml/（kg·h）、mg/（kg·h）或U/（kg·h）表示，人均体重按 60kg 计算，人体表面积按1.62m2计算。注射时间若不足1小时，按1小时计算。供试品每平方米体表面积剂量乘以0.027即可转换为每千克体重剂量（M） 内毒素限值按L=K/M计算， M为人用每公斤体重每小时的最大供试品剂量，以ml/（kg·h）、mg/（kg·h）或U/（kg·h）表示，人均体重按 60kg 计算，注射时间若不足1小时，按1小时计算。 修订背景 1、细菌内毒素与检查用水除了强调内毒素含量外，还强调应对内毒素试验无干扰作用。 2、强调用干热灭菌法（ 250℃、30分钟以上）去除内毒素与热原法同步。 3、根据某些药（如抗肿瘤药）用体表面积计算给药量的需要，增加了按体表面积给药时的计算方法。 注射用药品、生物制品建立细菌内毒素检查法指导原则 本原则依据2010年版药典制订，适用于注射用药品、生物制品建立细菌内毒素检查项目时进行的实验及研究。 需建立内毒素检查项目的品种 质量标准中有家兔热原检查法需转换为细菌内毒素检查方法的品种。 用于注射给药，但未有热原质量控制的品种。 注射用新药需建立热原质量控制的品种。 用于静脉给药的原辅料 建立方法时对鲎试剂及样品的要求 同时使用两个鲎试剂厂家的鲎试剂 每个品种至少三批样品（上市品种应检测两个以上生产厂家；新药需检测连续生产的样品）。 确定内毒素限值 一般按公式L=K/M计算。M为人每公斤每小时临床最大用药剂量，依据药品使用说明书，《临床用药须知》确定。 儿童用药如大于成人，以儿童为准。 为保障安全用药，对于抗感染、抗肿瘤、治疗心血管疾病等重症用的药品、需联合用药的药品，可根据计算值适当调整，严格至计