男性学实验室检查与质控ppt课件.ppt

王振强 zhen-qiang wang 山西省儿童医院 妇幼保健院 生殖中心 男性学实验室 不育症的发生率为10％－15％，其中约30％由于男性因素引起的，统称为男性不育症。 男性不育症患者大部分没有明显的临床症状。 实验室检测是评价男性生殖能力的重要手段。 量 2.0ml或更多 PH 7.2或更多 精子密度 20×106／ml或更多 总精子数 40×106/一次射精或更多 活力 射精后60分钟内，50％或更多具有前向运动 （即a+b级），或25％或更多具有快速前向运动（a级） 畸形率 ＜ 85％ 存活率 50％或更多存活 白细胞 ＜1×106／ml 该指标参考《WHO人类精液及精子宫颈粘液相互作用实验室检验手册（第四版） 精液分析正常参考值： 正常精子状态 射出的精液符合参考值 少精子症 精子浓度低于参考值 (精子密度20×106／ml或总精子数40×106/一次射精) 弱精子症 精子活力低于参考值(a+b级50％或a级25％) 畸精子症 具有正常形态的精子少于参考值(正常形态15%) 少、弱、畸精子症 表示3种变量均异常（两种变量异常时，可用两个前缀） 无精子症 所射精液中无精子 无精液症 不射精 精液变量的术语： 精子—宫颈粘液相互作用检测 体内试验（性交后试验）PCT 1. 时间选择 在排卵期进行。 2. 2天避免性生活,性交后9—12小时进行试验. 3. 在阴道后穹窿部吸取混合样本及用另一个注射器或导管吸取宫颈管内的粘液标本。 将这些标本置于载玻片上，加盖玻片，显微镜观察 结果观察 性交后9—12小时进行 精子活力分级:a，快速直线前向运动；b，慢或缓慢的前向运动； C，非前向运动；d，不活动精子。 意义: 能够提供精子寿命和存活情况. 前向运动的精子可排除宫颈因素作为不育原因的可能性。 简化的玻片试验 将一滴宫颈粘液置于载玻片上，用盖玻片铺平。 载玻片两侧各滴1滴精液，使其与盖玻片边缘接触，借助于毛细作用使精液移向盖玻片下，在宫颈粘液与精液之间形成一个清晰的接触界面。 该载玻片置于湿润的温箱内，37孵育30分钟 结果报告 正常 精子穿透粘液90%以上具有直线运动的精子 精子穿透粘液相的距离500um（约10个精子的长度） 异常 精子穿透粘液相，但很快失活或仅作“抖动”表示抗精子抗体的存在 精子未穿透精液—粘液的接触界面。 男性学组合项目 精液分析操作常规 (参照《WHO人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》第四版) 精液标本采集时间应在禁欲后2-7天。嘱病人按《取精指南》在实验室设立的取精室内采集精液。记录病人及其妻子姓名、联系电话、禁欲时间、标本采集时间及标本分析时间、采集是否完全。 记录精液总量、PH、液化时间、液化状态、外观、粘稠度。 显微镜初检： 用高倍镜（40×）观察10个视野，初步估计精子密度、活力、精子凝集和非精子细胞。 估记精子密度40×106/ml时，用F-10培养液按比例稀释精液，以避免精子碰撞造成分析错误。取一滴精液置Hamilton CASA系统进行分析。 系统设置：CASA系统温度设置为37℃，根据精子密度选择Analysis setup: Standard、High density、user-1（低密度精子分析）。 应选择精子分布均匀的视野扫描，如精子密度20×106/ml时，应分析超过400条精子。 显微镜检查未见精子的标本应用3000g离心15分钟，把所有沉渣重新悬浮成0.2ml，再彻底检查后发现无精子，才能作出无精子的判断。 如离心后发现有精子可按下列公式计算精子密度。 离心后体积×精子密度 精液总量 精子密度（×106/ml） 8． 精子存活率计数 将新鲜精液与伊红染液1：1在试管中混匀，30秒后取一滴上述液体置载玻片上并覆以盖玻片在400倍光学显微镜下观察。活精子不着色，死精子被染成红色，观察200个精子计数存活率。 男性学组合项目 计算机辅助精子分析（CASA） VCL-曲线速度（μm/s）精子头沿其实际的曲线。 VSL-直线速度（μm/s）根据精子头在开始检测时的位置与最后所处位置之间的直线运动的时间平均速度。 VAP-平均路径速度（μm/s）精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度