第20讲分离以尿素为氮源的微生物ppt课件.pptx

2016年10月选考题 32.【加试题】(7分)请回答从土壤中分离产脲酶细菌和脲酶固定化实验的有关问题 （1）LB固体培养基：取适量的蛋白胨、酵母提取物、NaCl，加入一定量的蒸馏水溶解，再加 ，灭菌备用。 （2）尿素固体培养基：先将适宜浓度的尿素溶液,用 灭菌过的G6玻璃砂漏斗过滤，因为G6玻璃砂漏斗 ，故用于过滤细菌。然后将尿素溶液加入到已经灭菌的含有酚红的培养基中，备用。 （3）取适量含产脲酶细菌的10-4、10-5两种土壤稀释液，分别涂布接种到LB固体培养基和尿素固体培养基上，培养48h，推测固体培养基上生长的菌落数最少的是 (A. 10-5稀释液+尿素固体培养基 B. 10-5稀释液+LB固体培养基 C. 10-4稀释液+尿素固体培养基 D. 10-4稀释液+LB固体培养基)。在尿素固体培养基上产脲酶细菌菌落周围出现 ，其原因是细菌产生的脲酶催化尿素分解产生 所致。 （4）制备固定化脲酶时，用石英砂吸附脲酶，装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱，其作用是 。;实验2 分离以尿素为氮源的微生物;一、实验原理;１. LB全营养固体培养基和尿素固体培养基的配制与灭菌（课本26页）;２.倒平板;２.倒平板;下列关于以尿素为氮源微生物培养与分离的相关叙述正确的是(　) ①对尿素溶液进行灭菌的最适方法是紫外灯照射灭菌(12·浙江改编) ②培养基分装到培养皿后进行灭菌(13·江苏) ③取单菌落适当稀释,用划线分离法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板(13·全国Ⅱ) ④细菌培养实验中进行计数时,应计数的是接种了各个稀释度样品的培养基上的菌落数(14·浙江) ⑤可以采用涂布分离法来测定活菌数量(15·全国改编) ⑥从土壤中筛选产脲酶细菌,使用的选择培养基应以尿素为唯一氮源(16·四川改编);(2014·台州温岭中学测试)下图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答以下问题： (1)A过程配制的培养基有_____________和_______________。配制过程中要用________作为培养基的凝固剂，其目的是为了__________________________。B过程尿素溶液用____________________使之无菌。该实验选用的是涂布分离法，??非划线分离法的好处是________________。 (2)有关E、F过程，下列实验操作中不正确的是(　　) A. 将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 B. 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板 C. 可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D. 用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出能分解尿素的细菌 (3)该实验的结果：A同学从培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因不可能是(　　) 土样不同 B. 培养基污染 C. 操作失误 D. 没有设置对照;4. 操作步骤：;1、 （1）高压蒸汽灭菌? 无菌水 （2）涂布?? 使水蒸汽凝结成的水滴留在培养皿盖上，若正放，会使 已形成的菌落相互混杂? 37?? 需要? （3）C 2．（1）目的菌 选择 （2）化合物A 异养需氧型 （3）减少 增加（4）划线