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脂代谢检验级2015ppt课件
最终导致血管壁呈增厚、狭窄,使某些脏器 (尤其是心、脑)供血不足而损伤,甚至危及生命。 高血压 年龄 冠心病家族史 血脂紊乱 吸烟 糖尿病 不可改变的 可改变的 NCEP Circulation 1994;89:1329–1445. Eur Heart J 1994;15:1300–1331. Wood D et al. Eur Heart J 1998;19:1434–1503. 冠心病 冠心病的主要危险因素 AS主要的危险因素 ①高脂血症 (高脂蛋白血症) ②高血压 ③吸烟 ④性别 ⑤遗传因素 ⑥内分泌因素 高胆固醇血症 引起动脉粥样硬化的脂蛋白 CM 颗粒大,一般不致AS, 但易诱发胰腺炎 LDL 相对较小, 是首要的致AS性脂蛋白 VLDL 升高已被确认为CHD的危险因子。 IDL 具有致AS作用 LP(a) As的独立危险因子。 动脉粥样硬化 HDL降低 第二节 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定 常规测定项目: TC、TG、 HDL-C、LDL-C 分析前的准备: 受试者的准备 标本采集 合格的试剂 校准物的选用 检测方法选择 是否空腹 采血体位 血液浓缩 抗凝剂 标本处理 存储条件 生物学波动 总胆固醇(total cholesterol,TC) 甘油三酯(triglyceride,TG) 高密度脂蛋白-胆固醇 (high dense lipoprotein cholesterol,HDL-C) 低密度脂蛋白-胆固醇 (low dense lipoprotein cholesterol,LDL-C) 载脂蛋白AⅠ(apolipoprotein AⅠ,ApoAⅠ) 载脂蛋白B(apolipoprotein B,ApoB) Apo(a) 临床血脂分析项目 TC升高:Ⅱb型、Ⅲ型 空腹血清 清澈 (TG正常) (TG升高) 测定TC TC正常:血脂正常 TC升高:Ⅱa 混浊 上层有“奶油”层 (CM升高) 下层清澈:Ⅰ型 下层混浊:Ⅴ型 均匀混浊 (VLDL升高) TC正常:Ⅳ型 测定TC 4℃过夜 (VLDL↑) (VLDL正常) 一、血清(浆)静置试验 二、血清(浆)总胆固醇测定 ★ COD-PAP法 CHE COD POD 胆固醇酯 + H2O 胆固醇 + 游离脂肪酸 胆固醇 + O2 △4-胆甾烯酮+H2O2 2H2O2+4-AAP+酚 醌亚胺(红色化合物)+4H2O 方法学评价 简便,快速,无腐蚀性,高,好,宽 CE水解不全,CHE活性受影响,易受干扰 常规方法 三、血清(浆)三酰甘油测定 检测方法 同位素稀释-质谱法 化学法 ★酶法(GPO-PAP) *磷酸甘油氧化酶法 乳酸脱氢酶法 甘油氧化酶法 化 学 法 1.抽提 2.皂化 3.氧化 4.显色 变色酸显色法 乙酰丙酮显色法 1、磷酸甘油氧化酶法 GPO-PAP LPL 三酰甘油 + H2O 甘油 + 3-脂肪酸 甘油 + ATP 3-磷酸甘油+ADP 3-磷酸甘油+O2+2H2O 磷酸二羟丙酮+2H2O2 H2O2+4-AAP+4-氯酚 苯醌亚胺+2H2O+HCL GK, Mg2+ POD GPO 甘油 + ATP 3-磷酸甘油+ADP 3-磷酸甘油+O2 磷酸二羟丙酮+H2O2 H2O2+氧受体 氧化的受体(不显色)+2H2O GK POD GPO 第一步反应 第二步反应 本法酶试剂比较稳定,灵敏度高,线性范围较宽两步法为中华医学会检验分会推荐方法 三酰甘油 + H2O 甘油 + 3-脂肪酸 甘油 + ATP 3-磷酸甘油+ADP 3-磷酸甘油+O2+2H2O 磷酸二羟丙酮+2H2O2 H2O2+4-AAP+4-氯酚 苯醌亚胺+2H2O+HCL GK, Mg2+ POD GPO LPL 2.乳酸脱氢酶法 【原理】 LPL 三酰甘油 + H2O 甘油 + 3-脂肪酸 甘油 + ATP 3-磷酸甘油+ADP ADP+磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸+ATP 丙酮酸+NADH NAD++乳
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