艾滋病实验室检测新技术 蒋岩 中国CDC性病艾滋病预防控制课件_1.ppt

检测新发或新近HIV感染的目的 l无须耗时并昂贵的前瞻性队列研究来识别早期感染。 l由单一的患病样本来估计人群发病率。 l以新发感染的个体为研究或干预对象。 l识别早期感染以进行早期治疗和临床关怀 l评估预防措施和目标 l监测亚型和药物抵抗株的传播 l找出适合疫苗实验的高危人群 TARHS：新发HIV血清转换的血清检测运算法则 暴露 HIV+ AIDS ? (1)敏感性试验 + + (2)STARHS试验 _ + 在同一时间应用两种不同试验分析血样来检测新发感染 （1） 敏感性试验（EIA） 血清转换早期即可出现阳性 （2）?非敏感性试验（改调的EIA：STARHS ） 血清转换晚期才可出现阳性 新发感染血清转换=EIA+ STARHS- STARHS试验的窗口期 暴露 EIA+ Detuned EIA+ AIDS 窗口期=从EIA+到detuned的EIA+之间的时间 在血清转换者有所不同，依赖于HIV的亚型和试验 Organo Tekniaka, 对亚型B，估计值为： 90% 3.3个月 75 4.0 50 5.1 25 6.4 10 8.2 STARHS的应用条件 非AIDS病人——AIDS病人有很低的抗体水平，象血清阳转 非HAART治疗——HAART治疗病人有很低的抗体水平，象血清阳转 * 艾滋病实验室检测新技术 蒋岩 中国CDC性病艾滋病预防控制中心 二十一世纪第二届全国性病暨皮肤病学术研讨会 2004年5月 中国南京 目的 方法 监测 感染检测 抗体检测(EIA/PA/RT) 检测策略 窗口期检测 抗原检测，核酸检测 pooling RT-PCR 诊断 感染诊断 WB 检测策略 近期感染诊断 STARSH方法 治疗评价 CD4/CD8测定 流氏仪检测 显微镜法 病毒载量测定 NASBA, b-DNA，RT-PCR 耐药性检测 基因型，表型 窗口期检测 抗原检测 核酸检测 Pooling RT-PCR方法 窗口期的范围 定义依据 时间长度 抗体检测 3-6个月 新的EIA试剂可以缩短至14-21天 抗原检测 1-2周 第四代抗原抗体检测试剂可以 使窗口期比第三代抗体试剂缩 短4-5天 核酸检测 5-11天 抗原检测 P24试剂盒，第四代EIA试剂（1997年在欧洲正式批 准用于血液筛查） 每一个HIV粒子含有1200个p24抗原分子=0.048fg 每一个HIV粒子含有2个RNA拷贝，如果病毒载量测 定结果为400拷贝/ml，即等于有2.4X105个分子 =0.0096pg p24抗原/ml，800拷贝/ml，即等于有 4.8X105个分子==0.019pg p24抗原/ml 目前最敏感的抗原检测试剂盒的检测阈值为0.01pg/ml 抗原在血清抗体阳转前2-18天既可以检测到 样本（血清/浆）中的p24抗原包括游离的抗原和病毒粒子中的抗原 EIA测定的抗原浓度(F)：病毒RNA拷贝数推算的抗原浓度(A)=0.16：2900 样本号 EIA(Cutoff) EIA(pg/ml) RNA拷贝/ml p24pg/ml F/A 1 3.1