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血细胞分析仪的应用及形态学复检课件
流式细胞技术、核酸荧光染色技术 待测血样稀释成单个细胞悬液,经过核酸荧光染色后,在 鞘液的约束下,排成单列通过测量区的细胞在垂直入射的 激光束照射和激发下,产生: 前向散射光(FSC,主要反映细胞的大小) 侧向散射光(SSC,主要反映细胞内容物的复杂度) 侧向荧光(SFL,主要反映核酸含量的多少) WBC/BASO通道(白细胞总数和嗜碱性粒细胞计数) 射频/直流电技术(RF / DC) 电学法: 射频RF:(核/胞质比率) 直流电DC: 细胞体积 在IMI通道中, 红细胞、血小板溶解 成熟白细胞膜磷脂多,也溶解 主要检测: 原始细胞 幼稚粒细胞 血小板聚集 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 红、白细胞碎片产生的原因 红细胞碎片 弥散性血管内凝血 微血管病性溶血性贫血 心源性溶血性贫血 其它 化学中毒、肾功能衰竭 血栓性血小板减少性紫癜和化疗 白细胞碎片 AML、淋巴瘤、严重感染、化疗 * 如何制定形态学复检规则(一) 以国际实验血液学发表的“41条”规则为依据 Lab Hematol 2005,11:83 中华检验医学杂志 2008, 31: 752 复检的绝对条件 报警提示 未成熟细胞 原始细胞 有核红细胞 仪器分群结果异常 确诊为或疑似血液恶性肿瘤者 复检的可调节条件 血细胞计数超出参考范围 (二)血细胞形态学复检 * 如何制定形态学复检规则(二) 涂片镜检阳性判断标准 国际血液学复检专家组 Lab Hematol 2005,11:83 中国血液学复检专家组 中华检验医学杂志 2008, 31: 752 涂片镜检要求 由2名人员进行双盲检测 计数结果 均值 形态结果 任何1名人员发现阳性即判断为镜检阳性 统计学分析 * 如何制定形态学复检规则(三) 阳性率 假阳性率 阴性率 假阴性率 符合率 复检率 14.23% 23.71% 59.61% 2.45% 73.84% 37.94% ①首先参考“41条”规则 ②降低复检率 从降低假阳性率入手 不能单纯追求复检率降低 ③控制漏诊率在临床可接受水平(5%) 防止降低假阳性率导致的假阴性率即漏诊率升高 ④不能改变复检的绝对条件 * 病例1——单核细胞增多 男,23岁 感冒9天 WBC NEUT LYMPH MONO EO BASO 6.62【109/L】 3.82【109/L】57.7【%】 1.25【109/L】18.9-【%】 1.24+【109/L】 18.7+【%】 0.02*【109/L】 0.3*【%】 0.06*【109/L】 0.9*【%】 分析仪测定结果: 报警提示: Monocytosis Immature Gran? Left Shift? 复检规则: 24.怀疑性报警:不成熟粒细胞? 34.左移报警? DIFF散点图上,单核细胞区域内可出现许多绿点(红色箭头示),提示单核细胞增多。 散点分布在中性粒细胞区域上方(绿色箭头示),提示出现幼稚粒细胞。 IMI散点图上的红点也证实这一结果。 * Stab Seg Lymph Mono Eo Baso Myelo Meta Aty-Lym 5.5【%】 48.5【%】 23.5【%】 17.5【%】 0.0【%】 0.0【%】 3.5【%】 0.5【%】 1.0【%】 涂片镜检分类结果: 单核细胞 * 核左移 中幼粒 * 病例2——嗜酸性粒细胞增多 女,20岁 荨麻疹 WBC PLT PDW MPV P-LCR PCT NEUT LYMPH MONO EO BASO 28.67*【109/L】 249*【109/L】 10.8*【fl】 10.0*【fl】 24.5*【%】 0.25*【%】 2.19*【109/L】 2.58*【109/L】 0.39+【109/L】 23.44*【109/L】 0.07*【109/L】 分析仪测定结果: 报警提示: Eosinophilia Leukocytosis PLT Clumps? DIFF散点图上,嗜酸性粒细胞区域内可出现许多红点点(红色箭头示),提示嗜酸性粒细胞增多。 复检规则: 20.嗜酸粒细胞绝对计数: 2.0X109/L 26.WBC结果不可信报警:* 30.PLT聚集报警? * Stab Seg Lymph Mono Eo Baso PLT Clumps (+) 0.0【%】 8.5【%】 11.5【%】 1.0【%】 78.5【%】 0.5【%】 涂片镜检分类结果: 嗜酸性粒细胞 血小板凝集 * 嗜酸性杆状核粒细胞 嗜酸性晚幼粒细胞 * 病例3——ALL(L1) 女,15岁 患者自觉食欲减退,8月初发热,约2天后退
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