免疫学沿免疫球蛋白2015硕.ppt

本章重点 The basic structure and special structure of immunoglobulin. The functions of Ig. Thanks! IgM 1. IgM pentameric macroglobulin 2. IgM is composed early in fetus, and early in immune response. 3. Natural antibodies against blood cell determinants. IgD Traces of it are normally found in the blood. The function of IgD in serum is unknown. Marker of matureB cells。 IgE Mediator substances that lead to allergic disease (Type I). ? 人工制备抗体PRODUCTION OF ANTIBODIES 多克隆抗体的制备 单克隆抗体的制备 基因工程抗体 多克隆抗体的制备 抗原免疫动物所得到的血清，含有多种抗体的混合物，称多克隆抗体(polyclonal antibodies).特异性不高，容易出现交叉反应。 单克隆抗体的制备 用杂交瘤技术得到的抗体，由一个B细胞克隆产生的同源抗体，称单克隆抗体(monoclonal antibodies,mAb).其结构高度均一，纯度高，特异性强，无交叉反应。 人工制备抗体 基因工程抗体genetic engineering antibody 鼠源mAb在应用中存在的主要问题：人抗鼠抗体（human anti-mouse antibody, HAMA）的产生。 基因工程抗体：借助DNA重组和蛋白质工程技术，在基因水平上对Ig分子进行切割、拼接和修饰，重新组装而成的新型抗体分子。 嵌合抗体（chimeric Ab） 鼠V+人C 改型抗体（reshaped Ab）： 鼠CDR+人FR和C区 小分子抗体：仅由Fab或Fv组成的抗体 多功能抗体：双功能抗体、抗体融合分子等 基因工程抗体的制备 基因工程抗体的发展方向： 人源化；小型化；多功能化 人工制备抗体 治疗性单抗技术演化 淋巴细胞抗原识别受体编码基因及其多样性产生的机制 T细胞抗原识别受体TCR B细胞抗原识别受体BCR 在T、B细胞发育早期存在着分隔的一定数量的胚系基因片段，在淋巴细胞分化成熟过程中发生不同的重排和组合，从而产生多种多样的BCR 和TCR。 BCR和TCR多样性的产生 编码人BCR基因库有H，κ, λ。 胚系基因以基因片段的形式存在下。 V区编码基因：重链为V、D、J 基因片段；轻链为V、J 基因片段。 C区编码基因：V区基因的下游。 各种基因片段都有多个，只有一个参与组成编码基因 BCR编码基因的结构特点 人类TCR胚系基因结构示意图 -AAAA Exon1 Exon2 Exon3 Exon3 Exon3 Exon2 Exon2 Exon1 Exon1 Intron1 Intron2 Intron1 Intron2 mRNA protein Germline DNA Primary RNA BCR：重链：V+D+J+C； 轻链（κ、λ）：V+J+C TCR：β、δ链：V+D+J+C； α、γ链：V+J+C BCR、TCR基因重排 重链基因的重排(recombination) 重排有关的酶 末端脱氧核苷酸转移酶（TdT) 抗体基因表达的特点 等位基因排斥(allelic exclusion) 位于一对染色体上的轻重链基因，只有其中一条染色体上的基因得到表达。 同种型排斥(isotype exclusion ) κ轻链和λ轻链之间的排斥，一个Ig分子只表达一种轻链。 免疫球蛋白类别转换（class switching） 在抗体应答过程中，抗原激活B细胞后，分泌的Ig会从IgM转换成其它类别的Ig 膜型和分泌型的转换 BCR和TCR多样性产生的机制 相同点： 组合造成的多样性： 众多VDJ基因片段中的一种参与组合 连接造成的多样性： N-核苷酸 BCR和TCR多样性产生的机制 不同点 BCR ： 体细胞高频突变造成的多样性： 抗原刺激后已成熟B细胞的V基因上发生点突变 TCR 1）无体细胞高频突变 2）N-核苷酸插入多于BCR 3）TCR V区基因发生有效重排机会较多 3. 铰链区(hinge r