克隆技术 （二）.pptVIP

克隆技术 组员：孙 旭 20090370117 王恩莹 20090370118 克隆 技术 克隆 技术 克隆 技术 “克隆”是“clone”的音译,其含义是无性繁殖,即由同一个祖先细胞分裂繁殖而成的纯细胞系,该细胞系中每个细胞的基因彼此是相同的。动物克隆,就是指通过无性繁殖由一个细胞产生一个和亲代遗传性状一致、形态非常相像的动物。 克隆 技术 从1938 年克隆设想的提出到现在克隆生物的出现，克隆技术已经过半个多世纪的发展。 早期的动物克隆研究仅限于两栖类和鱼类,直到20 世纪80 年代,核移植克隆技术才开始应用于哺乳动物。根据供核细胞的不同,可将动物克隆研究分为三个阶段: 克隆 技术 胚胎细胞克隆阶段 1981 年, Illmensee 和Hoppe 报道了他们用小鼠的正常囊胚或孤雌活化囊胚的内细胞团细胞作为核供体,直接注入去掉雌雄原核的受精卵胞质中,重构胚体外发育到桑葚胚或囊胚后移植寄母子宫,获得克隆小鼠,这是第一次用胚胎细胞对哺乳类进行核移植获得成功。 克隆 技术 胚胎细胞克隆阶段 1983 年,美国科学家利用核移植技术和细胞融合方法获得了克隆小鼠。 1986 年,英国的Willadsen 用绵羊的8 —16 细胞阶段的胚胎细胞作为供体进行核移植,首次应用电融合的方法克隆出一只小羊。 克隆 技术 胚胎细胞克隆阶段 此后,科学家们又相继克隆出小鼠、绵羊、牛、兔、猪和猴等。 我国科学家也在20 世纪90 年代成功开展了胚胎细胞克隆兔、山羊、小鼠、牛和猪等研究。 克隆 技术 同种体细胞克隆阶段 1997 年2 月,英国罗斯林研究所Wilmut 等人宣布,他们用6 岁成年羊的高度分化的乳腺细胞进行了核移植,成功地获得了克隆羊“多莉” 克隆 技术 同种体细胞克隆阶段 这是第一次用成年体细胞作为供核细胞,由此说明高度分化的成年动物的体细胞可在适当条件下发生逆转,恢复全能性,这是生物技术史上具有划时代意义的重大突破,是克隆技术的一个里程碑,也改写了部分生物学的理论。 此后，克隆牛，克隆鼠，克隆猪等相继出现，克隆技术进一步成熟。 克隆 技术 异种体细胞克隆阶段 异种体细胞克隆与同种体细胞克隆的差异在于供核体细胞与受体卵母细胞来源于不同的物种。即将一种动物的体细胞核移植到另一种动物的去核(遗传物质) 卵母细胞中。 克隆 技术 异种体细胞克隆阶段 体细胞核能否在异种卵胞质中去分化并支持早期发育 异种核质能否相容 异种重构胚能否着床并进行全程发育 ? 遇到的问题 克隆 技术 异种体细胞克隆阶段 1999 年,中国科学院动物研究所生殖生物学国家重点实验室将成年大熊猫体细胞作为供核体细胞移植到去核(遗传物质) 的日本大耳白兔卵母细胞中,成功地构建出异种重构胚,体外培养获得孵化囊胚。 2001 年将重构胚移植寄母子宫,获得了着床的重大进展。 克隆 技术 随着体细胞克隆技术的发展,它与人类生产和生活的关系也就愈发密切,不同研究领域的科研人员都认识到克隆技术在不同领域的应用前景。 异种体细胞克隆阶段 2001 年, Nature Biotechnolo2gy 上报道了异种体细胞克隆濒危哺乳动物———欧洲盘羊的成功,为濒危动物的保护提供了重要的借鉴。 克隆 技术 动物克隆技术 产生克隆动物的方法称为动物克隆技术。 通过显微操作技术把细胞核(供体)移入去除遗传物质的成熟卵母细胞(受体)中，细胞核在移入的细胞质的支持下，发生发育程序重编(reprogramming)，形成重组胚，使得核质重组体与正常受精卵一样，经细胞分裂、分化，并在母体内发育成一个新的动物个体口，这称为细胞核移植技术。在高等哺乳动物中，细胞核移植技术是生产克隆动物最为有效的克隆技术，因此，动物克隆技术实际上是指细胞核移植技术。 克隆 技术 动植物 克隆 动物克隆技术 目前，哺乳动物体细胞核移植技术形成了一套比较完善的程序，主要包括：核受体胞质的准备、核供体细胞的选择和处理、重构胚构建、重构胚激活以及重构胚培养等。 克隆羊、克隆猪等都是动物克隆技术的成果。在后面的案例中详细讲述动物克隆技术。 克隆 技术 动植物 克隆 植物克隆技术 植物基因的克隆技术是生命科学研究的重要组成部分，是现代生命科学技术中最核心的内容，它是随着20 世纪70 年代初DNA 体外重组技术的发明而发展起来的， 其目标是识别和分离特异基因并获得基因完整序列，确定其在染色体上的位置，阐明其生化功能，并利用生物工程手段应用到生产实践中去。 克隆 技术 动植物 克隆 植物克隆技术 功能克隆 功能克隆（Functional Cloning）就是从蛋白质的功能着手进行基因克隆， 是人类采用的第一个克隆基因的策略。 克隆 技术 动植物 克隆 植物克隆技术 功能克隆 根据已知的生化缺陷或特征确认与该功能有关的蛋白质