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tb的实验室检查进展
TB的实验室检查进展
1882年3月24日郭霍氏首次发现结核分枝杆菌(ybateriu tuberulsis,以下简称结核杆菌)为人类治疗结核病带来了希望。自20世纪50年代以来不断发现有效的抗结核药物,使疾病的流行得到了一定的控制,但近年来由于不少国家对结核病的忽视,再加上人口的流动和增长、艾滋病的传播等因素,使疾病疫情下降缓慢,有的国家和地区甚至还有所回升,结核病已成为仅次于艾滋病的第二大致死性疾病。人类已进人了21世纪,生存质量正在进一步提高,然而,作为一种古老的传染病,结核病的疫情却呈全球性上升趋势。据H估计,目前全球约有20亿人感染结核杆菌,每年有800万新发病例和300万人死亡。尤其是结核杆菌多重耐药菌株的出现,给结核病防治工作带来了一定的难度。 在我国,根据2000年第4次全国结核病调查估算,全国现有 5.5亿结核病病例,将近全国人口的一半,疫情相当严重,形势非常严峻。由流行病学资料显示,我国结核病呈高患病率、高耐药率、高死亡率、高感染率、低递降率、病例发现率低等特点 [1]。结核病是危害人民身体健康的重要传染病之一,也是当前农村因病致贫、因病返贫的主要传染病。为此,人们迫切需要解决这些问题的方法企图建立先进的诊断方法和治疗措施,以减少结核病对人类健康所造成的危害。
一个世纪以来,人类对结核病的诊断学上做了大量的工作,从形态学到分子生物学技术的不断发展,医学工作者对结核分枝杆菌的生物学特性、致病性、耐药性、诊断、抗结核药物的研制等都取得了巨大的成就。现对结核病实验室诊断技术方面的进展情况做个概述。
1 细菌学检测
1.1 涂片镜检法 为各国结核病实验室都在使用的最基本的细菌学检查方法,具有快速简便且价廉等优点,缺点是无法判别细菌是死还是活,而且敏感性较低;特异性差,各种抗酸杆菌均可着色,同时受到染色剂质量的影响,因此往往抗酸染色法的误诊率高[2]。而且由于受到检测原理的限制,检测的突破性的很难得以进展。荧光镜检法有更高的灵敏度,对于含菌量少的病例,检出率高于一般显微镜的检出率,且所需检查时间比使用一般显微镜检查少一半多[3]。
1.2 结核菌常规培养法 结核菌常规培养法的优点是灵敏度、特异度、正确率较高 [2],是鉴定死、活菌的可靠方法,是目前活菌检测不可替代的方法,也是化疗反应的主要监测指标; 缺点是培养时间过长,需要4-8周才能报告结果。
1.3 药物敏感性试验 用于鉴定结核分枝杆菌对抗结核药物的敏感水平,通常是在结核菌培养的基础上进行的,需要的时间比常规培养法更长。
1.4 结核菌分型鉴定 根据不同分枝杆菌的理化特性,以生物化学方法为主,可以对分枝杆菌进行分型,鉴定分枝杆菌的不同菌种。此法操作繁琐,个别试验所用药物有一定的危险性。
1.5 结核菌快速检测系统 此法检出时间较常规培养法明显缩短,可从常规的8周缩短到3-14d,具有操作简便自动化程度高、灵敏度高等优点,这对结核病细菌学诊断发挥了重大作用,只是仪器和试剂的价格过于昂贵,难于推广应用。
2 免疫学诊断方法
2.1 结核菌素试验 (T试验) 结核菌素皮肤试验是最初 ? 用于诊断的免疫学诊断试验,主要用来了解被试者是否感染了结核分枝杆菌或作为有无结核病的辅助诊断依据,在结核病流行病学方面,可以作为人群感染后结核的危险度的指标,同时也是检测卡介苗接种效果的一种方法。缺点是:由于是一种间接诊断结核病的方法,假阳性率高极不易标准化。现在主要用结核菌素纯蛋白衍生物(PPD作检测)。随着人们对肺结核分枝杆菌认识的深人,在研究区分结核分枝杆菌感染与非结核分枝杆菌感染的PPD 试剂已取得了实质性的进展。这类制剂有作为菌种鉴定前的筛选手段应用于临床的前景。PPD试验作为一种检测细胞介导的免疫应答方法,已得到广泛的承认,但BG接种使用PPD试验很难对MTB感染作出诊断。PPD试验目前在早期诊断和鉴别诊断结核病方面还是一种重要的方法[3]。 2.2 酶联免疫吸附试验 (ELISA)用于检测被检者血清 中的抗PPI抗体,在20世纪80年代,该技术在我国得到了推广应用,这种方法具有与同位素相似的灵敏度,而且避免了同位素的放射性污染而得以较广泛地应用。
2.3结核特异性抗体的定性试验 主要有两种方法:检测血清中的抗38KD抗体和抗LA抗体。方法便捷快速,阳性率在70% 以上,缺点是有麻风结节的麻风病患者也能检测出相应的抗38KD 抗体,出现假阳性。另外,由于结核菌的抗原性较弱,属间和种间有共同的抗原决定簇,体液免疫与结核病的相关性尚未明确,致使ELISA这种血清学诊断技术没有取得实质性的进展。
3 分子生物学诊断技术
结核
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