溶胶凝胶非标记免疫传感器检测乙肝表面抗原课件.ppt

溶胶-凝胶非标记免疫传感器检测乙肝表面抗原 背景介绍 回顾 实验原理 实验方法 创新点 图示 参考文献 介绍点 背景介绍 乙肝表面抗原（ HbsAg） HbsAg实际上就是一项肝炎病毒的外壳部分。在血清中查到它的时候，由于在大多数情况下它并不含有病毒颗粒，因此并不能反映病毒有无复制、复制程度以及传染性强弱、预后等问题。目前血清HbsAg阳性仅仅作为HBV感染的标志。 采用电位传感器测定电位，对于HBsAg 阴性血清,电位响应值ΔE 和阳性血清不一致,据此,作为临床判别的依据 回顾 以生物学组件作为主要功能性元件，能够感受到特定的靶分子并按照一定规律将这种感知转换成可识别信号的器件或装置 与测定抗原抗体反应有关的传感器称为免疫传感器 抗原抗体结合前后可导致多种信号的改变,如在重量、光学、热学、电化学等方面。光学分析的研究比较活跃,但是由于电化学分析有其独到之处,如可以实现在体检测,不受样品颜色、浊度的影响(即样品可以不经处理,不需分离),所需仪器设备相对简单。 基底电极 它是免疫传感器组成的重要基础，为电化学免疫反应提供机械结构和反应信号的转化和传导，决定对发生的电化学免疫反应是否感应，感应的敏感性和感应程度的强弱，信号转化能力、转化方式、反应信号与背景信号的信噪比等，影响免疫电极的准确性、特异性、一致性、稳定性、经济与否、能否实现一次性使用和批量生产等，进而影响其应用于实践 实验原理 采用溶胶-凝胶(sol2gel) 技术包埋乙肝表面抗体(HBsAb) ,涂布于金盘电极表面,构成sol2gel2HBsAb/Au 非标记免疫传感器,用于检测人血清中乙肝表面抗原( HBsAg) 【Hepatitis B Surface Antigen 】。该传感器对HBsAg 的电位响应遵循Nernst 方程传感器的电位响应值ΔE 与HBsAg 浓度C 的对数呈线性关系 实验方法 免疫电极为指示电极,饱和甘汞电极为参比电极。首先对空白的PBS 进行测定,待电位稳定后记录其空白电位值( E0) ,然后加入适量HBsAg 样品溶液,记录3 min 时的稳定电位值( Ex) 。以Δ E = Ex - E0作为传感器对HBsAg 的电位响应信号。利用循环伏安法(CV) 对传感器进行表征时是采用三电极系统:免疫电极为工作电极,铂丝为对极,饱和甘汞电极为参比电极。电位扫描范围在- 0. 4～0. 8 V ,扫描速率100 mV/ s。 传感器的循环伏安循环 分别以、道丝网印刷碳电极（八.五通道），Pt 、W 等金属电极为基底制成sol2gel2HBsAb 膜免疫传感器,它们对HBsAg 的电位响应ΔE，得出ΔE-t 曲线 ,ΔE 与lg HBsA g 呈线性关系,线性回归方程 ΔE = c + alg HBsA g 传感器对电位响应图 t-s曲线 创新点 原实验采用Au、Pt、电极需要自制 本实验直接采购道丝网印刷电极 道丝网印刷碳电极 丝网印刷电极由于具有诸多优点 制作简便 生产成本低 实际应用性强 不需预处理 可以直接购入使用 [1]陆晓军，鞠先.脱氧核糖核酸电化学传感器的原理及其应用.分析化学2003，31（1）：110-115 [2]陈玲.生物传感器的研究进展综述.传感器与微系统,2006,25(9):4-7 [3]霍群,蔡豪斌.电化学免疫传感器.临床检验杂志,2003,21(3):181–182 [4]钟桐生,刘国东,沈国励等.电化学免疫传感器研究进展.化学传感器,2002，22(1):7-14 [5]周谷珍,李继山,蒋健晖等.基于酶催化沉积放大的电化学阻抗法用于人免疫球蛋白M的免疫检测.分析化学,2006,34(2):155-158 [6]张炯,万莹,王丽华等.电化学DNA生物传感器.化学展,2007,19(10):1576-1584 [7]罗斌.电化学免疫传感器的发展应用[J].辽宁化工,2009.(06) [8] 赵广英,马超. 电化学免疫传感器研制过程中电极的选择与改进[J).食品科技，2009，(01) [9]王丹,廖伟娇,杜晶春. 免疫传感器载体上SPA法固定抗体的条件探讨[J].广州医药，2007，（02) [10]付冠艳.新型电化学生物传感器的研究.湖南大学，2009，29（10） 参考文献：