医学类a酵母菌的形态观察课件.ppt

a酵母菌的形态观察 一 教学要求 学习并掌握形态观察及死活细胞的鉴别方法。 二 实验原理 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比细菌大几十倍甚至十几倍。大多数以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验是通过美蓝染液水浸片和水—碘液水浸片来观察酵母的形态和出芽生殖方式。 三 材料与器材 菌种：斯达油脂酵母（Lipomyces starkeyi）2. 1390. 培养基和试剂：麦芽汗琼脂培养基，0.05％ 和0.1 吕氏碱性美蓝染色液，革兰氏染色用碘液. 显微镜，玻片等. 实验一 b 酵母菌子囊孢子的观察 一 教学要求 学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法。 二、基本原理 子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的有性孢子。在酵母菌中，能否形成子囊孢子及其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。酵母菌形成子囊孢子需要一定的条件，所以对不同种属的酵母要选择适合形成子囊孢子的培养基。 Sexual spores Ascospore Formed in a sac (ascus) 三 材料与器材 菌种：同前. 试剂：5％孔雀绿水溶液，0.5％番红水溶液，95％乙醇. 显微镜，玻片等. * * 精品PPT课件 浏览免费 下载后可以编辑修改。 /xmlxh /jnlxh / / / 本文档下载后可以修改编辑，欢迎下载收藏。 美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色，借此即可对酵母菌的死活细胞进行鉴别。 Scanning electron micrograph of the common bakers and brewers yeast Saccharomyces cerevisiae. Note the budding division and previous bud scars. 四 操作步骤 1、菌种活化 将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上，25~28℃培养48 h左右备用。 2、美蓝镜片的观察 1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色掖，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。 2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。 3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。 4）染色约0.5h后再次进行观察，注意死活细胞数量是否增加。 5）用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操作。 3、水一碘液镜片的观察 在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液，然后在其上加3小滴水，取少许酵母菌苔放在水一碘液中混匀，盖上盖玻片后镜检。 注意事项 1、加染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。 2、盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。 六 思考题 1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同，对酵母菌死细胞数量有何影响？试分析其原因。 2、在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌？ 四 操作步骤 1、菌种活化 将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上，25~28℃培养24h左右，然后再转种2~3次。 2、产孢培养 将经活化的菌种转接到麦氏琼脂斜面上，25~28℃培养约1周。 3、制片 取经产孢培养的酵母斜面培养物，在净洁载玻片上按常规涂片、干燥、固定。