口蹄疫综述课件.ppt

口蹄疫研究综述FMD临床症状：盖文燕 FMD病原学：吕律 吴磊 FMDV的致病性和宿主范围：王刚 徐超  FMD的流行病学：刘涛 FMD的诊断：杨顺利 FMD的预防与控制：李菁 FMDV临床症状 盖文燕 发病初期出现口、鼻、蹄及乳房等无毛部位出现水疱，进而破裂，溃疡、结痂，痂块脱落成斑痕，表现出精神抑郁、发热、流涎、跛行 根据本病的特征和临床表现的延续性可分为急性和亚急性经过。急性持续一至数日，出现典型的临床症状；亚急性持续2-3周，出现特征的临床症状，但往往不严重 FMDV病原学 吕律 吴磊 FMDV的分类学和血清型 分类地位：小RNA病毒科/口蹄疫病毒属； 7个血清型：A型、O型、C型、南非1型、南非2型、南非3型、亚洲1型；包括近70个亚型。各型之间无交叉保护性,各亚型之间仅有部分交叉保护性。 病毒粒子的形态 病毒粒子的物理结构 FMDV基因组的基本结构 基因组为单股正链RNA，既是mRNA，又是负链RNA的模板，约有8500个核苷酸组成。 基因组的基本结构是： VPg-5′UTR(S-polyC-IRES)-(L蛋白)-结构蛋白P1（VP4-VP2-VP3-VP1）-非结构蛋白（P2-P3）-3′UTR-poly(A) 下图是 FMDV的基因组模式图。 5′UTR和3′UTR的结构和功能以及开放阅读框 5′非编码区（untranslation region,UTR）约1300个核苷酸，有丰富的二级结构，第一个nt是U，与VPg共价结合。5′UTR有几个十分保守的序列框，没有帽子结构，但有IRES，共同的结构特点是5个“三叶草”型的二级结构，起始密码子的前十几个核苷酸处有聚嘧啶封闭蛋白（PTB）结合的一个特征性结构。 高度结构性的5′UTR起着稳定RNA的作用，参与调控病毒蛋白翻译和RNA复制。 S片段（small fragment）约有360个碱基，形成一个长的茎环结构，这一结构可以使基因组避免宿主细胞核酸酶的消化。 PolyC(聚胞嘧啶区)：PolyC的长度从100到420个核苷酸不等，PolyC片段中几乎由胞嘧啶构成，偶尔有几个尿嘌呤，缺失PolyC的全长cDNA不具有感染性,因此PolyC是维持病毒RNA具有感染性的必要元件 内部核糖体进入位点（internal ribosome entry site,IRES）：在5′UTR中IRES作用最为重要，是蛋白翻译顺式元件（Cis-acting element）。IRES指导病毒蛋白合成是不依赖帽结构的，一部分活性必须的序列形成双链，另一部分需要富含胞嘧啶得一级序列，后者常位于环的单链区，IRES保守的功能核心区靠近3′段，能与真核翻译起始因子eIF2、eIF3、eIF4B、eIF4A、eIF4G-Ct(C-terminal region,L蛋白酶裂解eIF4G的产物) 、特异性反式作用因子（ITAF45）、PTB和核糖体亚单位结合形成起始复合物。 3′UTR包括两个部分，一部分位于非结构蛋白3D编码区之后，长约100个核苷酸，能形成特殊的高级结构。另一部分是poly(A)尾巴结构，3′端带有poly(A)尾，其上游约100nts是3′UTR，长度（35-100nts）不确定，该结构不是转录完成后加上的，而是基因组固有的，它是病毒RNA 聚合酶3D识别的信号，参与病毒负链RNA的复制。末端的A残基作为模板与尿苷酸化的引物VPg-pUpU结合，以合成病毒基因组的负链RNA。 病毒的复制 吸附、穿透和脱衣壳 ： 当病毒吸附到细胞表面后，140S粒子裂解形成12S的五聚体，从而释放出RNA。这种裂解作用并未发生在细胞表面，因为病毒吸附后，从细胞中仍可以抽提到具有感染性的140S的病毒颗粒。通过使用促溶酶体消溶剂，提高细胞内含体的PH值，结果证明病毒粒子进入酸性内涵体内可能发生破碎。目前已经证实，一种基因工程FMDV，它不能够使VP0分列成熟成VP2和VP4，其没有感染性，但它能够吸附培养细胞，并且具有酸敏感性。因此，140S病毒自身裂解为五聚体并不能够导致感染性，但是，它经过裂解后必定会有其它的事件发生。这些结果表明，病毒的受体仅仅负责了病毒进入易感细胞的细胞膜，它对病毒的脱衣壳并没有作用，FMDV的这种特性和FMDV具有利用多种受体来感染细胞的能力是一致的。 病毒的翻译 脱衣壳之后，病毒RNA通过一种尚不明了的机 制释放到细胞质中，并且开始进入病毒翻译循 环。 FMDV RNA翻译的起始仅需要产生Lpro 切割 eIF4G产生的eIF4G C-端切割产物，结合 FMDV IRES，与连接有eIF4A 和 eIF3的 40S 核糖体亚基相互作用