食用菌菌种选择及菌种标准化生产技术ppt课件.ppt

* 通常分三级。 又叫一级菌种或试管种，常用接种量：1只母种→4-6瓶原种。又叫二级菌种或瓶装种，每瓶原种→约20袋栽培种（两头接种时为10-15袋）→栽培袋（熟料栽培的接种量为3%-5%，生料栽培的接种量为5%-10%）。 又叫三级菌种或袋装种， 　　是指杀死一部分微生物。是指杀死全部微生物 * ①库房、培养室等可根据规模确定间数。②操作间用于装袋等，面积最好在20m2以上。③接种室和培养室外，最好设有缓冲间。 * 1.每天菌种生产量与冷却室、接种室、培养室的面积应当适应。经验比例：500：5：1：36 2.培养基制作、灭菌、冷却、接种应当一条龙流水作业。 3.冷却室和接种室在条件不允许情况下可经两室合用，冷却后用塑料膜在室内架起临时接种室进行接种。 4.资金使用的重点应放在灭菌、冷却、接种三处的设备和室内标准化设置上。 5.如菌种场等，应设在当地主要风向的上风头；带污染源的库室，如原料库等，应设在当地主要风向的下风头。 6.原料库、晾晒场应远离冷却室、接种室和培养室。 7.灭菌锅应是双门的，一门与有菌区（培养基制作室）相通，另一门与无菌区（冷却室）相通，双门不能同时开放。 8.冷却室、接种室要求作水磨石或油漆地面，四周墙壁和天花板油漆防潮，安装空气过滤装置。冷却室配备除湿和强制冷却装置，接种室配备分离式空调机。 9.培养室要有足够的空调装置，保证高温季节能正常生产。 10.工作人员必须具有一定微生物常识，经过严格无菌操作训练，进入无菌区前须沐浴更衣。 11.菌种灭菌后的运输工具必须灭菌或消毒后，方可进入无菌区使用。 * * ，选取组织的方法与平菇不同 * ，这个过程叫做转管或母种的扩大 香菇母种脱毒复壮后发菌情况 2. 筛选复壮菌种的检测方法 直接观察：用肉眼观察复壮后试管中菌丝洁白、粗壮，爬壁能力强。 显微镜检查：在载玻片上滴一滴蒸馏水，然后挑取少许菌丝置水滴上，让菌丝体充分展开，盖好盖玻片，再置显微镜下观察。也可通过菌丝体染色后镜检观察。复壮菌种菌丝体应粗壮，菌丝节较长，呈分枝状；与未复壮前菌丝节很短，分枝很浓密，菌丝较纤细形成对比。 经特殊染色后，应能看到双核及锁状联合，以确保复壮后菌丝为双核菌丝。 3. 菌丝生长速率测定 将复壮菌种，转接至PDA平板培养基中央，待菌丝形成放射状菌落后，用直径0.5cm的无菌打孔器研菌落边缘同心圆处取菌丝块，将相同大小的菌块接种到PDA平板培养基上（每一平板可接3块，均匀摆放小，相当于3次重复。25℃恒温培养5天后，每隔24小时测定菌落直径，连测5天，计算并统计菌丝平均生长速度。 复壮后菌丝平均生长速度应高于未复壮前。 4. 其他指标测定 吃料能力测定：将复壮试管母种接入新鲜配制的装在试管中的栽培料培养基中，置24℃下进行培养，5天后观察菌丝生长状况并测定生长速度。复壮后菌种与未复壮的菌种相比，菌块萌发快并迅速向培养料中生长伸展，吃料能力应明显增强。 第一潮菇产量测定： 采用相同出菇培养基制备栽培袋，发满菌后按食用菌出菇环境要求进行管理，测定第一潮菇产量。复壮后菌种第一潮菇产量应高于复壮前。 酯酶同工酶图谱：以新鲜菌丝体或子实体为材料制备新鲜酶液，采用SDS技术及酯酶染色技术显示酯酶同工酶图谱，复壮前后菌丝体或子实体同工酶图谱应具相同谱带，复壮后酯酶条带应比复壮前着色较深。　 （三）菌种制备与培养 1. 标准化生产对菌种培养时间的要求 母种最佳培养时间7-10天，菌龄掌握在刚长满斜面即用于扩接原种或继代培养。 原种接种后应在40-50天长满瓶，菌龄掌握在菌丝长满瓶10天左右使用。 栽培种接种后菌丝应在30-45天长满瓶，菌龄掌握在菌丝长满瓶后15天内使用。 2. 菌种标准化生产对技术的要求 2.1 使用品种： 应使用经省级以上农作物品种审定委员会登记的品种，并且清楚种性。不应使用来源和种性不清的菌种和生产性状未经系统试验验证的组织分离物作种源生产菌种。并从具相应技术资质的供种单位引种。 2.2 移植扩大： 母种仅用于移植扩大原种，一支母种移植扩大原种不应超过6瓶(袋)；一瓶原种移植扩大栽培种不应超过50瓶(袋)。 2.3 生产工艺流程： 培养基配制→分装→灭菌→冷却→接种→培养(检查)→成品 2.4 容器要求： （1）母种：使用玻璃试管和棉塞，试管18 mm×180 mm或20mm×200mm，棉塞要使用梳棉，不应使用脱脂棉。 （2）原种：使用650 mL-750 ml，耐126℃高温的无色或近无色的玻璃菌种瓶，或850 ml耐126℃高温白色半透明符合GB 9687卫生规定的塑料菌种瓶，或15cm×28cm耐126℃高温符合GB 9688卫生规定的聚丙烯塑料袋。也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞。 （3） 栽培种 ：同原种。也可使用≤17 cm×35