姜汁凝乳机制的初步探究及凝乳成分的优化提取.ppt

根据正交设计的特性，对A1、A2、A3来说，三组试验的试验条件是完全一样的（综合可比性），可进行直接比较。如果因素A对试验指标无影响时，那么kA1、kA2、kA3应该相等,否则，A因素的水平变动对试验结果有影响。因此，根据kA1、kA2、kA3的大小可以判断A1、A2、A3对试验指标的影响大小。如果kA2kA3kA1，可断定A2为A因素的优水平。 注：表中K1平均、K2平均、K3平均是指各因素每个水平的平均值，R表示极差，其大小反映了各影响因素的强弱。A、B、C与表3中所指相同。（K表示各因子的相同水平所对应的实验值之和） A B C 各因素主次顺序 优水平 吸光度A280mm K1平均 K2平均 K3平均 R 注意事项 姜辣素中主要成分姜酚所处环境pH介于4.5-12，温度小于200℃.否则，姜酚易发生化学变化。 乙醇和乙醚均为易挥发物质，实验过程应特别注意妥善保管。 严格按照分光光度计操作规程进行实验，尽量减少实验误差。随着显色时间的延长，吸光度将略有下降，因此应尽快进行测定。 。 实验预期与可行性分析 本实验安全性高，无污染，符合绿色环保要求 生姜是一种蔬菜，在我国大部分地区都有栽种，分布范围广且价格低廉。而且提取实验对仪器的要求不高，易于推广 生姜中含有大量生姜蛋白酶、姜精油和姜辣素，姜精油和姜辣素很容易辨别，它们不仅颜色不同，气味也有很大区别。 三种物质在常温下都比较稳定。在第一个实验提取时，同时开始配制本实验中的所用到的各溶液的配制，从而为后面的实验节省时间 姜汁凝乳机制的初步探究及凝乳成分的优化提取 南方医科大学 生物技术学院 临床输血 相乐阳 刘 乐 王 丹 曾俊超 摘 要  姜汁凝乳，俗名姜撞奶或姜埋奶，是广东地区流行的传统名优小食品。本实验首先是对姜汁中具有凝乳功能的物质成分进行了研究。实验从生姜中提取了生姜蛋白酶粗提物、姜精油以及姜辣素，并分别进行了定性与定量分析。并将这三种物质在同一条件下进行了凝乳实验，探究生姜中的有效凝乳成分。 随后，以提取温度、提取次数、料液比为影响因素对生姜中有效凝乳成分(生姜蛋白酶)的提取进行了正交实验，在此基础上确定上述 3 个因素的最佳组合，为生姜蛋白酶的综合利用和深入研究提供初步理论依据。 关键词 生姜蛋白酶 姜精油 姜辣素 凝乳 Folin-酚试剂比色法 正交法 实验目的 姜汁中姜蛋白酶、姜精油以及姜辣素的提取 对姜汁中三种成分进行化学鉴定（定性、定量） 姜汁凝乳机制的分析 姜汁中凝乳成分的优化提取 实验原理 Folin-酚试剂比色法 姜辣素中的主要物质是姜酚、姜烯酚、副姜油酮、姜酮、姜辣二酮、姜辣二醇 利用Folin - 酚试剂易被酚类物质还原而呈蓝色反应的性质,借助比色法对姜辣素提取物进行定量分析。 . 蛋白质的理化性质 蛋白质分子中游离的氨基可以与水和茚三酮结合呈现蓝紫色。 正交试验法 用正交试验对提取次数、提取温度、料液比进行研究，在此基础上确定此三个因素的最佳组合。 实验设备 电子天平1台 量筒（100mL,1个） 烧杯（50mL,2个） 试管6个 棕色瓶1个 铁架台1个 圆底烧瓶 胶头滴管1个 玻璃棒1根 容量瓶（25mL，1个）容量瓶（250ml，1个）小刀1把 普通漏斗1个 滤纸 电热炉1个 普通冰箱1台 组织捣碎机1台 塑料袋1个 低温高速离心机1台 抽滤装置1套（布氏漏斗 橡胶塞 循环水真空泵 抽滤瓶 导气管 棉花） 常压蒸馏装置1套（蒸馏瓶 温度计 冷凝管 尾接管 接收瓶 蒸馏头 导管 橡胶塞 ） 高压灭菌锅1台 锥形瓶（50ml，3个）分光光度计1台 电热恒温水浴锅1个 移液枪1支 实验材料及试剂 材料：新鲜生姜(或干姜粉)250g 生姜蛋白酶样品 姜精油样品 姜辣素样品 试剂：新鲜生姜(或干姜粉)250g 0.2mol/LNa2HPO4溶液 2mol/LNaH2PO4溶液 茚 三酮 95%的乙醇 70%的乙醇 无水乙醇 4mol/Lph5.5的乙酸溶液 丙酮 蒸馏水 乙醚 NADI试剂 乙酸乙酯 钨酸钠20g 钼酸钠5g 85%的磷酸溶液10ml 浓盐酸20ml 硫酸锂3g 双氧水15ml 实验步骤 试剂及溶液的配制 配制磷酸缓冲液（pH5.8，0.2mol/L）的配制：取0.2mol/LNa2HPO4溶液8.0ml, 0.2mol/LNaH2PO4溶液92.0ml，加入同一支试管中，得到pH约为5.8的缓冲溶液。 茚三酮的制备：取0.5000g 茚三酮于20mL95%的乙醇中，再加入6ml 浓度为4mol/Lph5.5的乙酸溶液，得到水合茚三酮试剂。 福林试剂的配制：称取20g钨酸钠和5