基于光谱识别模式结合RP-HPLC法测定葛根芩连片中黄芩苷的含量.docVIP

　　基于光谱识别模式结合RP-HPLC法测定葛根芩连片中黄芩苷的含量 【摘要】 目的 建立RP-HPLC对葛根芩连片中黄芩苷含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(Stable Bond Analytical 4.6×250mm，5μm)，流动相为甲醇-0.2%磷酸水(50：50)，流速为1.0ml/min，柱温30，检测波长280nm。结果 操作简单，结果准确，平均回收率为96.48%。结论 本法操作简便、准确、重现性好，可用于葛根芩连片中黄芩苷含量的测定方法。 【关键词】 葛根芩连片;黄芩苷;RP-HPLC 　　[Abstract]Objective To set up a method for determining the content of baicalin in Gegen Qinlian Tablets with HPLC.Methods Chromatography was performed on a Agilent ZORBAX SB-C18(Stable Bond Analytical 4.6×250mm，5μm),with a mixture of methanol-0.2% phosphoric acid(50:50) as the mobile phase.The detection wavelength was 280nm ,and the column temperature was maintaned at 30,and the flow rate was 1.0ml/min.Results The mean value of recovery rate is 96.48%.Conclusion This methed was shown to be simple, accurate, with a good reproducibility and could therefore be used for the quality control for Gegen Qinlian Tablets. 　　[Key words] Gegen Qinlian Tablets;Baicalin;RP-HPLC 　　葛根芩连片是由葛根、黄芩、黄连、炙甘草四味中药材组成的中成药制剂，具有解肌清热、止泻止痢的功效，用于湿热蕴结所致的泄泻、痢疾等症[1]。其中黄芩为该中成药中的君药，故在质量控制时选用测量黄芩中主要有效成分黄芩苷的含量。本文采用HPLC方法对葛根芩连片中的黄芩苷进行了含量测定，获得较为满意的效果，并结合PDA检测器对样品中黄芩苷色谱峰的光谱纯度进行了有效的定性。 　　1 实验部分 　　1.1 仪器 　　Waters 2695高效液相色谱仪(Waters2996二极管阵列检测器，Empower色谱工作站)，超声波清洗器(KQ2200DB，40kHz，80W，上海新苗医疗器械制造有限公司);混合纤维素酯微孔滤膜(孔径：0.45μm)，电子分析天平(Sartorius BS 224 S), SZ-93自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)。 　　1.2 试剂与材料 　　甲醇(色谱纯，20070315112)，乙醇(分析纯，20070827093)，黄芩苷对照品由中国药品生物制品鉴定所提供(批号110715-200212，供含量测定使用)，水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。葛根芩连片(河南禹州市药王制药有限公司，批号分别为081005、081010、081012)。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件与系统适用性考察 　　Agilent ZORBAX SB-C18 (Stable Bond Analytical 4.6×250mm，5μm)色谱柱;流动相：甲醇-0.2%磷酸水(50：50)，流速：1ml /min，柱温30，检测波长280nm，在此色谱条件下，理论塔板数大于7000，分离度大于1.5，进样量为10μl。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取黄芩苷对照品适量，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.483mg/ml的黄芩苷对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取供试品10片，研细，混匀，精密称取相当于平均每片的样品重量，置50ml容量瓶中，精密加入70%乙醇50ml，摇匀，称定重量，超声处理(功率200W，频率50Hz)30min，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，过0.45μm微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液。以上所配溶液的HPLC色谱图见图1。图1 样品HPLC色谱图 　　黄芩苷对照品(A)、供试品(B)及阴性样品、(C)HPLC色谱图 　　光谱纯度分析及样品中黄芩苷色谱