蟾蜍离体坐骨神经腓肠肌标本制备课件_1.ppt

刺激和兴奋 刺激stimulation：指细胞所处环境因素的变化。刺激要能使细胞发生兴奋，就必须达到一定的刺激量。 刺激和兴奋 刺激stimulation：指细胞所处环境因素的变化。刺激要能使细胞发生兴奋，就必须达到一定的刺激量。 1. 刺激强度与肌肉收缩反应 阈强度能引起组织发生反应的最小刺激强度，又称为阈值。具有阈强度的刺激称为阈刺激（threshold stimulus）。 2.刺激频率与肌肉收缩反应 单收缩twitch：骨骼肌受到一次短促有效刺激时,可发生一次动作电位,随后出现一次收缩和舒张。 两个阈上刺激，相继作用于神经-肌肉标本，如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩； 较高频率连续刺激作用于标本时，出现多个收缩反应的融合，新收缩过程与上次尚未结束的收缩过程发生总和，称为强直收缩tetanus （复合收缩）。 后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，称为不完全强直收缩incomplete tetanus 。 后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩完全融合，肌肉处于持续的收缩状态，称为完全强直收缩complete tetanus 。 在生理条件下，支配骨骼肌的传出神经总是发出连续的冲动，所以骨骼肌的收缩都是强直收缩； 静息状态下，中枢神经也经常发放低频率神经冲动至骨骼肌，产生一定程度的强直收缩，称为肌紧张(muscle tone)。 10. 实验装置连接 将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上（不宜太紧，线与桌面垂直）。 把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，保证神经与刺激电极接触良好。 换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。 启动生物信号采集系统软件， 选择好通道和采样参数设置， 启动记录按钮，开始记录。 11. 实验观察 （1）刺激强度对骨骼肌收缩的影响 使用单刺激或自动强度调节方式，波宽为1ms，刺激强度从零开始逐渐增大，找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（阈强度）。 继续增强刺激强度，观察肌肉收缩反应是否也相应增大。 继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小的刺激强度，即最大刺激强度。 （2）刺激频率对骨骼肌收缩的影响 用最大刺激强度的连续刺激，选择经典方式逐渐增加刺激频率，分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率时的肌肉收缩变化。 【注意事项】 1）双毁髓时应注意捻动探针并使蟾蜍头部前俯，防止耳后腺分泌物射入实验者眼内，如被射入，应立即用生理盐水冲洗眼睛。 2）标本制备过程中应经常滴加任氏液，防止标本干燥，以保持正常生理活性。 3）避免污染、过度牵拉或用器械夹伤坐骨神经和腓肠肌。 实验结果？ * * * 实验一 刺激频率、刺激强度与骨骼肌收缩形式的关系 实验目的（purpose）： 1.掌握坐骨神经腓肠肌标本的制作方法。 2.观察不同刺激强度与肌肉收缩力量的关系 。 3.观察不同刺激频率的改变与肌肉形式的关系。 刺激强度 刺激持续时间 刺激强度/时间变化率 刺激量 【实验原理】 刺激强度 刺激持续时间 刺激强度/时间变化率 刺激量 ＜ 阈刺激 阈下刺激 ＜ 阈上刺激 有效刺激 一条骨骼肌纤维 “全或无” (all-or-none) 达到阈值→肌纤维收缩 超过阈值→收缩力不增加 一块骨骼肌 一定范围内，肌肉收缩力 的大小与刺激强度成正比 阈下刺激→无兴奋收缩 阈刺激→少数兴奋性最高的肌纤维产生收缩 刺激强度↑→ 肌纤维被兴奋数量↑，肌肉收缩力↑ 最适强度→所有的肌纤维均兴奋，肌肉收缩最大 ＞最适强度 → 收缩力不增加 动作电位时 程(相当于绝 对不应期)仅 1～2毫秒 骨骼肌可在机械收缩过程中接 受新刺激发生新的兴奋和收缩 收缩过 程可达 几十～几百 毫秒 实验药品与器材： 蛙手术器械，电刺激器，生物医学信号采集系统，张力换能器，任氏液等。 实验对象（subject）：蟾蜍 眼科剪：仅用于血管、神经 组织剪：软组织 粗剪刀：骨骼、肌肉 实验步骤：１.破坏脑和脊髓 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　 持蛙 　 (2)枕骨大孔的判断 (3)破坏完全的标准 枕骨大孔 （Occipital foramen) 2.剪除躯干上部和内脏 (1) (2) (3) 3.剥去皮肤 将标本放在盛有任氏液的培养皿中 4.洗净双手和用过的手术器械,再进行下列操作 5.分离两腿 将标本放在盛有任氏液的培养皿中 7.用玻璃分针游离坐骨神经 6.将标本固定在蛙板上 腹面向上 8.剪断股骨,膝关节处所有的肌腱 (1) (2) 9.检查标本的兴奋性 Tested tissue Zn Cu + Ringer’s solu