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胶陀螺子实体提取物化学成分及抑菌活性研究 　　摘要 对胶陀螺（Bulgaria inquinans Fr.）子实体的化学成分及提取物的抑菌活性进行了初步研究。结果表明：从子实体提取物中分离得到4个化合物，乙酸乙酯和水相对沙门氏菌（Salmonella enterica）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、链球菌（Streptococcus）和大肠杆菌（Escherichia coli）均有抑制作用，正丁醇相对沙门菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用。在浓度为100 mg/mL时，针对以上4种细菌，乙酸乙酯和水相抑菌率分别为61.72%、65.47%、39.79%、37.40%和68.52%、65.06%、51.26%、68.86%，正丁醇层对沙门菌和金黄色葡萄球菌的抑制率分别为50.11%、69.41%。在该浓度下4个相萃取液对玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum）和禾镰刀菌（Fusarium graminearum）没有表现出明显的抑制作用。 　　关键词 胶陀螺；化学成分；抑菌活性 　　中图分类号 Q939.56 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）10-0153-02 　　胶陀螺（Bulgaria inquinans Fr.），属子囊菌亚门（Ascom-ycotina）盘菌纲（Discomycetes）柔膜菌目（Helotiales）胶陀螺科（Bulgariaceae）[1]，又名拱嘴蘑、猪嘴蘑。胶陀螺群生于阔混腐木上，通过对采自吉林省长白山地区胶陀螺子实体提取物的化学成分以及抑菌活性进行研究，结果表明其子实体的次生代谢产物具有抗菌作用，为合理开发利用这一天然菌物资源提供研究基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与试剂 　　胶陀螺采自吉林省长白山地区，经吉林大学植物科学学院秦建春副教授鉴定为胶陀螺（Bulgaria inquinans Fr.）。环己烷、石油醚（60～90 ℃）、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、氯化钠（分析纯，北京化学试剂有限公司生产），酵母粉、蛋白胨、琼脂（北京奥博星生物技术有限责任公司生产），头孢哌酮钠舒巴坦钠（批号：1112232，北京紫光药业有限公司生产），硝酸咪康唑乳膏（批号：120904J，深圳三九药业生产），购自吉林省长春市吉林大药房股份有限公司，硅胶（青岛海洋化工分厂生产），GF254-薄板（浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂生产），Sephadex LH-20（GE healthcare公司生产），ODS-C18（Merck公司生产）。 　　1.2 供试菌株 　　沙门氏菌（Salmonella enterica）、金黄色葡萄球菌（Staph-ylococcus aureus）、链球菌（Streptococcus）和大肠杆菌（Esch-erichia coli），以上菌种由吉林农业大学食品科学学院提供。玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum）、禾镰刀菌（Fusarium graminearum），由吉林大学植物科学学院提供。 　　1.3 试验仪器 　　OS-2100型旋转蒸发器（Rikakikai公司生产），A-1000s型循环水式多用真空泵（Rikakikai公司生产），DZF-6050型真空干燥箱（梅特勒-托利多仪器公司生产），KQ-250DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器公司生产），BSA 124S-CW型电子天平（赛方利斯科学仪器（北京）有限责任公司生产），DXF-200型粉碎机（由长沙常宏制药机械设备厂生产）。 　　1.4 提取分离 　　将胶陀螺子实体600 g，25 ℃烘干，粉碎，甲醇室温提取3次，每次12 h，每小时搅拌1次，合并全部提取液，减压浓缩得到提取物，加水悬浮，分别用等量石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取3次，萃取液减压浓缩得到各部分萃取物，低温保存。乙酸乙酯和正丁醇层通过硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS-C18柱层析进行分离，得到纯品，通过理化和核磁共振等手段进行结构鉴定。 　　1.5 抑菌活性测定方法 　　采用纸片扩散法，在无菌条件下，取直径为6.0 mm的圆形滤纸片蘸取供试溶液（完全浸透且无液滴滴落），在超净工作台中吹干后将该滤纸片均匀摆放在涂有菌悬液的培养基上，每个培养皿中均匀摆放4个纸片，分别为供试药、阳性药和阴性对照，重复3次。置于培养箱中培养，采用十字交叉法测量抑菌直径，记录结果。抑菌率的计算公式： 　　抑菌率（%）=■×100 　　1.6 统计方法 　　测定指标采用x±s表示，所有数据由SPSS16.0统计软件进行One-Way ANOVA分析，并计算相应的统计学参数。 　　2 结果与讨论 　　2.1 化合