中山大学药理学实验——戊巴比妥钠对小鼠催眠作用有效量（ed50）测定.ppt

戊巴比妥钠对小鼠催眠作用的半数有效量（ED50）测定 【目的和原理】 半数有效量（50％ Effective dose，简写为ED50）指药物引起50％实验动物出现阳性结果（反应）所需的剂量。如以动物死亡率来表示反应，则用半数致死量（50％ Lethal dose，LD50）或半数致死浓度（50％ Lethal concentration，LC50）表示。ED50或LD50是表示剂量一反应的最常用的方法。 除ED50的观察指标（药效）与LD50的观察指标（死亡）不同外，两者的测定原理相同。 剂量与有效百分率作图 对数剂量与有效百分率作图 实验动物对药物的敏感性存在着个体差异。如以不同剂量对动物的死亡率制成曲线图，横轴表示剂量，纵轴表示死亡率，则见低剂量时动物死亡率的变动很缓慢，在高剂量时死亡率变动更为缓慢，以致曲线的上部拖得很长。但在出现50％死亡的附近，则由于剂量的变动引起死亡率的变动比较骤急，曲线呈陡直形式。说明50％死亡率是比较灵敏的指标。但在实验中，不可能用一次实验正巧得到50％死亡率的剂量，故必须运用科学的实验设计和结果统计方法处理而求得。 根据原始数据，用剂量与死亡数分布绘成的，呈一个长尾Ｓ型曲线。 用对数剂量来表示，则该曲线上所示的大剂量那一部分，相应地缩短，使曲线成为对称的S形。数据改为剂量对数与死亡数分布的曲线，即成为一个正态分布的曲线，这样就可以按正态曲线的原理处理。曲线上死亡率为50％点的剂量对数，再从反对数求得的剂量，这是计算LD50的基本原理。 本实验的观察指标 ED50：以翻正反射消失作为判断动物睡眠的指标。把受试小白鼠轻轻地置于仰卧位，如果在半分钟内不能翻正，即认为小白鼠处于睡眠状态。记录并统计动物睡眠发生率。 LD50：在规定的观察7天的时间内记录动物的死亡数并 统计动物的死亡率。 本实验目的是应用随机、重复、对照的实验设计原则，进行设计及测定药物的质反应的量效关系。掌握测定药物半数有效量（ED50）和/或半数致死量（LD50）的方法、原理、实验步骤、计算过程及意义 。测出药物的ED50或LD50及其相关参数，认识生物个体差异及衡量药物效应强弱或急性毒性大小的方法。 图11-4-3剂量对数与有效百分率分布 图11-4-4正态曲线下的面积与标准正态离差及 概率单位的关系 【实验】 【实验对象】 小鼠。 【实验器材和药品】 注射器（1ml）、针头（4号）、小烧杯、小鼠罩、托盘、计算器。 戊巴比妥钠、苦味酸（标记动物号用）。 【实验步骤】 1. 实验准备及预试 动物: 一般用健康活泼的小鼠。体重 18～20克，雌雄各半（雌鼠应无孕）。有时用大鼠、豚鼠等。从外地购进的动物通常需在本实验室饲养一周。 给药途径: 易溶于水的药物可作口服（灌胃）、皮下注射、腹腔注射或静脉注射。油剂可口服、皮下注射或肌肉注射。不溶于水的药物可用1％羧甲基纤维素钠制成混悬剂灌胃。小鼠用药量一般为 0.1～0.2 ml/10g体重， 灌胃每次不超过 0.5 ml，腹腔注射每次不超过 0.6 ml。 预试 其目的是找到该药0％（Ｄmin）和100％（Ｄmax）有效（或死亡）的大致剂量范围，以便正式实验时在此剂量范围内设置5～6个实验剂量组。预试方法常用几个剂量组（每组动物4只），如剂量比为1、3、9 的三个组，使实验给药液容积相同而药液浓度不同。给药后观察动物有效（或死亡）情况，观察7天或更长（视药物而定）。如果剂量10mg/kg无效（或无死亡），而剂量30mg/kg及90mg/kg均全部有效（或死亡），则Ｄmin ～ Ｄmax的大致范围为10～30mg/kg，即可作正式实验。如果3组均全无效（或全不死）或全部有效（或全死亡）均则表示剂量选择不当，要再次预试，往下或往上找剂量范围 预试 因此预试的目的是确定如下数据（如上例子）: Ｄmax ＝30 mg/kg ，Ｄmin ＝10 mg/kg ,Ｄmax/Ｄmin ＝30／10＝３ 2. 正式实验（1）计算各组剂量 根据预试测出的动物全有效（或全死亡）剂量（Ｄmax ）、全无效（或全不死）剂量（Ｄmin），在此范围安排5～8组剂量。设 n 为组数，r 为公比（相邻两剂量之比，较小的剂量作分子）: 各组剂量计算：以上算得的 值小于1 。求出 r 后，各组剂量分别为: 第1组 Dm 第2组 Dm 第3组 Dm 2 …… 如取n ＝ 5 组,上例公比 ＝ 0.76，各组剂量为 30，22.8，17.3，13.2，10 mg/kg （2）配制药液 一般先配制