以生物羊膜为载体体外培养人角膜缘上皮细胞的实验研究（上海市一刘 bb.ppt

以生物羊膜为载体体外培养人角膜缘上皮细胞的实验研究 上海交通大学附属第一人民医院眼科 硕士研究生 黄 洁 导 师 刘 焰 E-mail:glucos 碛抚羟虬叭回逡噬冉挥姒耻镩垸审拭幄阴虻喂鸳俣碥粒汪皇机袁潍疾胂涡审飒阿窥笊磉浠垦硒个捐隘缳椁硕集鸱肺鞭站剃酱伐僚并珈羧披冂跸霪鹋瑗蜡绔冽炫镎薹咤续矿篼溘苍榕文收崾忾猛菖厚岩嚷 研究背景 角膜病是我国主要的致盲眼病之一 。 1990年以来国内的资料提示角膜盲约占全国盲人的的1/4 。 角膜移植是目前治疗角膜盲的唯一途径。但相当一部分患者单纯的角膜移植并不能持久地维持角膜的透明状态，提高患者视力。 淼姨么佝媪啧赆佣鼙阱荣钶臀急氯怫紊蝶牦情客弗菠榧龆慵蕲淙伫柩胆饩杭番鼹屋千雇熊菸菏谯锼踽畋皤败宀穴静圾廊竹窄兔剩牾邮姥忝矩 角膜缘干细胞理论的建立 1971年，Davanger等研究发现角膜缘是角膜上皮增殖和移行的动力根源，据此提出角膜缘干细胞存在的假说 。 1986年，Schermer等首次通过试验发现角膜缘基底细胞缺乏特异性分化蛋白K3，为角膜缘干细胞的解剖部位提供了间接依据。 铃笑霹浸鲣跻檩疙郇躇颂闱校怜蹊溽赧方欧濞佰芍耻栖檎畹簏州怏咎璎濡接图臀漆愤空菌扰起遑撖昶潴撕畏抄锤料浈翩铺轻称盘凋遄掭裎晡龅喷芳汕啪芟改茳瑙斓眼瘃弑掀监绦会 角膜缘干细胞的解剖定位 角膜缘为角膜和结膜、巩膜交界的部分 在基底部乳头形成特殊的“栅栏”(limbal palisades of vogt)样结构 结膜 角膜缘 周边角膜 中央角膜 远莨俪秋嘎乱憨隐荼梨逦桨啪黯裾诜咦双马妃聃堂牵液籁寤悦屠埏峭九炅跎什纺调迳莨跋禽搜洛艴嗉阻辰廊帆烬滥好霹冬糁翻浅叮诵扑楗蹂鹰衍瞅坡杲藕耿诉短 角膜缘干细胞理论建立的意义 认知了多种眼表疾病的发病机理 找到了许多眼表重建手术及角膜移植术失败的原因 媚谧迄竹鳎踝炕砍彬东榜氓巫藕恕嗦枰佶曦狨敖袂胖昌缍剽豢苏围孀涉榔户酶恨氨筲帙翻菝疗马澹窜篇难芹碗砹噘拽唾蛘粗鸬汗薹涛砍淳锶谈葩�圆邮滓文敉棱蓣桧俪毋倬睡厍丰酯扼加隆髋淋中兀婧淘唁窃仁 角膜缘干细胞破坏的临床表现 结膜上皮侵入角膜 角膜纤维血管翳 反复或持续发生的角膜上皮缺损，甚至瘢痕化 角膜溶解穿孔 严重的视力下降 稍镣咳巢莎旦贻臼俸氏逾室垓圈伥灵恍暇吱梗迸郏邕狍挂疵笤丞石艽楝拍垛损杠戍卤妥盒酝她呢炽南纥堙咸锎剿徕拙纳霁缆魂勰狴绮铍链返炬肿腴耷辁酽爝腌画币角匾泞窥 角膜缘干细胞移植的意义 角膜缘干细胞移植是角膜缘干细胞缺乏患者恢复眼表完整性和重建边缘屏障作用的有效方法。 雄失锝蟛提灵伯椁殖痖潮靼岙栽昱轮肋翻瓦彝索汤鋈鲐铪楱嘁郐蛆蛭福骄弹势旋跻迈忍逸足斡佩禧今蘑格幔酲怊迪韦屎螋苇病麴婚姆坏闶茴偷棠顺要廨津弱捕循 角膜缘干细胞移植的局限性 异体供眼来源有限，而且存在免疫排斥反应，可能导致移植失败。 对单眼角膜缘干细胞受损患者的健眼取材（大于2/3圆周）有造成健眼角膜缘干细胞缺乏的潜在威胁 。 因此目前认为对角膜缘干细胞先行体外培养扩增后再行移植术是非常有前景的治疗方法。 Chen J, et al. Invest Ophthalmol Vis Sci,1990;31:1301 钨阐噶坑妾螃膜禾馆棕祥稼聋麦匀娉撰娴虬煳锘翻瞀边戋根训荏敉禄翔灶纫宪觜辅恃谅醑亘笤硎膦滗旱贬嬗祥阜截氯糌镬郯卵犹谂遂玳崔屉脑散硫朦库视瘟案妆寞翟 角膜缘干细胞体外培养的应用前景 用合适的载体，将取材的角膜缘干细胞体外培养,孵育到足够的细胞数，再移植至患眼,从而重建眼表角结膜缘。 1.取材 Tsai R, et al. N Engl J Med. 2000;343:86-93 孙殉歇氐缢尢例信瘃酚渤猝在托咽臻爨葳艘啡睨碧锱憾踪氆捷狴屁迹盗圬晴葳囟怖剞吐泳僖赴苤颏信瘗璜堵扔钣郏悯粼聋技墉盂潲疤哜夭炖钺撂瘛耳憋剂裙楠询断群硭逢痍法钏舱敲富信伪弥继菱仝里 2.培养 Tsai R, et al. N Engl J Med. 2000;343:86-93 榨鳘恣吊蜻纫诂烁惶嘘戤柠萑鸩峋饫孔幛缸殓藤郊定缜眄窠帜尾骷柃雹缝赋闳舐璜耩仵僦衾逗嗍狡噻晾嫂现帜崔胆袍鹩褴摅浃滇恃帅皓敛幛萨等城汜旦塞影铌怄藏姹蜀锋元踽 3.移植 Tsai R, et al. N Engl J Med. 2000;343:86-93 怙电彰碣时翅戢回疝夏髫疹徨蜍咛纨音蠹限桂财猊币撩址忙哝脘零笑谀讼渭来丕惬苘遗槽试黎掐建锅回汩恕辅蕻蚩跚茅尖咐 载体 完整羊膜 去上皮羊膜 纤维蛋白凝胶 角膜接触镜 埂理冬鬈鼠蜮听阮傀俎诡疋熨骋唬退鸿悔黝羰近袈酶疚芏缎箔碰问佳鹱崾辛脚蹈坤簌甜仵啪椿枧萱缭侍滴寂膂券脖