动物用分子诊断试剂与基因工程疫苗研究开发基地建设.ppt

动物用分子诊断试剂与基因工程疫苗研究开发基地建设 附 件 目 录 乳胶凝集抗体检测试剂盒新兽药证书 伪狂犬病乳胶凝集抗体检测试剂盒获得国家级二类新兽药证书，1999年被农业部指定用作全国伪狂犬病普查。 猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗获一类新兽药证书 伪狂犬病基因缺失疫苗研制 鉴 定 意 见 受中国生物工程开发中心委托，2000年11月2日，由湖北省科技厅在武汉组织专家对华中农业大学承担的“伪狂犬病基因缺失疫苗研究”专题进行鉴定，鉴定委员听取了汇报、审阅资料、观看实物产品和直接听取用户反应，形成如下鉴定意见： 1．课题组用自行分离、鉴定的猪伪狂犬病毒鄂A毒株，建立了病毒基因组DNA文库，克隆、鉴定、测序了该病毒的22个基因，其中18个基因的序列已被美国Genbank收录。这对该病毒的分子生物学与分子致病机理研究和诊断试剂与基因工程疫苗研制等奠定了坚实的基础。 2．利用基因重组和基因缺失技术构建了TK-/LacZ+、TK-、gG-/LacZ+、gE-、TK-/gG-/LacZ+和TK-/gE-等6株基因缺失重组病毒，经过试验免疫，确定了gG-和gE-重组病毒作为基因缺失灭活候选疫苗毒株，TK-/gG-/LacZ+和TK-/gE-重组病毒作为基因缺失弱毒候选疫苗毒株。 3．TK-/gG-/LacZ+疫苗毒株已按新兽药证书的要求，进行了系统的研究，证明该疫苗对猪安全有效，已通过农业部农业生物基因工程安全评价。经过中试和田间试验，取得了很好的防制效果，优于目前国内外的同类产品。 4．利用大肠杆菌、酵母和重组杆状病毒表达了gG和gE等结构基因，用其表达产物建立了gG-ELISA（酶联免疫吸附试验）、gE-ELISA和gG-LAT（乳胶凝集试验）、gE-LAT鉴别诊断方法，在临床上能区分接种疫苗猪与野毒感染猪，为根除和监测猪伪狂犬病提供了有效的手段，经查新，国内外均无gG-LAT和gE-LAT两种诊断方法。 综上所述，该项研究结合我国养猪业的实际，选题正确，有着显著的经济与社会效益和重要的学术意义。其研究成果居国内领先、国际先进水平。其中建立的gG-LAT和gE-LAT两项诊断方法，使用方便，易于推广，填补了国内外空白。 建议将基因缺失疫苗和鉴别诊断试剂，尽快产业化，为控制和根除我国猪伪狂犬病作出贡献。 鉴定会主任委员：沈荣显 副主任委员：甘孟侯 猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗与快速诊断试剂盒研究 鉴 定 意 见 ? 受农业部中华农业科教基金会委托， 2000年11月2日，由湖北省科技厅主持，在武汉组织国内同行专家对华中农业大学承担的“猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗与快速诊断试剂盒”项目进行鉴定，专家组听取了项目主持人的汇报，审查资料、查看产品，形成如下鉴定意见： 1．该课题组成功地分离、筛选、鉴定的猪伪狂犬病鄂A毒株，具有增殖滴度高和免疫原性好的特点，以该毒株研制的油乳剂灭活疫苗，按照新兽药研制的要求，完成了各项试验，获得农业部颁发的一类新兽药证书，填补了国内空白。产品经转让中牧股份有限公司成都药械厂批量生产，在全国应用后，取得了明显的控制效果，获得显著经济与社会效益。 2．建立了猪伪狂犬病乳胶凝集诊断试剂盒，该方法简便、快速、敏感性高、特异性强，便于基层和现场使用。1999年被农业部指定为全国猪伪狂犬病普查的方法，经全国20多个省、市应用，效果良好，制品试行规程已通过农业部新兽药评审，填补了国内空白。 3．制定了中华人民共和国农业标准“伪狂犬病检疫规程”，其中建立的聚合酶链反应（PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、乳胶凝集试验（LAT）、琼脂扩散试验、荧光抗体试验、血清中和试验、家兔接种试验等标准方法与试剂均已通过标准化委员会复核合格，为我国猪伪狂犬病的诊断和口岸检疫提供了标准方法，填补了国内空白。 4．研制的兔抗猪IgG酶标抗体效价达1:50000，经查新超出国内目前的1:1600和国外1:20000的水平，为我国猪病ELSIA检测方法提供了可靠的试剂，完全可替代进口产品。 课题组针对严重危害我国养猪业的伪狂犬病开展了猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗与快速诊断试剂盒研究，选题正确，获得显著的经济与社会效益，其成果达到国内领先、国际先进水平，其中兔抗猪IgG酶标抗体制备技术优于国际水平。 建议加速猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗与快速诊断试剂盒成果的产业化和推广应用。 鉴定会主任委员：沈荣显 副主任委员：甘孟侯 2002年八月份，我们向农业部农业转基因安