SRY基因检测-小鼠SRY等基因的PCR扩增.ppt

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2018-06-24 发布于浙江
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SRY基因检测-小鼠SRY等基因的PCR扩增.ppt

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SRY基因检测-小鼠SRY等基因的PCR扩增

实验26 小鼠SRY等基因的PCR扩增（设计性实验）一、实验目的 1、学习基因组DNA分离技术，制备小鼠基因组DNA模板。 2、学习PCR技术的基本原理、一般方法，利用PCR技术扩增小鼠SRY等基因中的特定HMG-box保守序列。 3、设计SRY等基因的引物。 4、提高学生实验素质，培养学生学研究和创造性能力。二、实验要求 1、对电泳图谱进行显微摄影、并打印出照片。 2、确定小白鼠有无SRY基因。 3、分析成功或失败的原因。三、实验条件 1、仪器 PCR仪、电泳装置、紫外观察仪、恒温水浴锅、玻璃匀浆器、常规试验用品。 2、试剂（1）模板DNA制备需要的：细胞裂解液，PBS（pH=7.0），10mg/ml蛋白酶K，7.5M乙酸铵，酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)，100%乙醇、70%乙醇，4mg/ml核糖核酸酶，TE缓冲液（pH=7.6）。 3、实验材料本次试验以小白鼠为实验材料。引物1根据小白鼠SRY基因HMG-box设计。产物220bp。引物2为小鼠ZFY/ZFX基因引物，产物：447-445bp，作阳性对照用。四、实验说明 1、实验原理： A、PCR技术的基本原理 B、琼脂糖电泳 2、实验方案、步骤由同学自己设计： A、基因组DNA的提取 B、小白鼠SRY基因中HMG-box的PCR扩增 C、PCR扩增产物的琼脂糖电泳检测 D、写出实验报告。五、注意事项乙酸铵，酚:氯仿:异戊醇有潜在危险，使用时要谨慎。 * *