六：操作技术规范.ppt

八. 对血液、体液、组织和排泄物的防护规范 （一）标本的收集、贴标签及运输 1.应始终坚持标准的防护措施；所有操作都要戴手套完成。 2.从病人或动物身上采集血液应由受过训练的人员完成。 3.进行静脉采血时，应以专用的一次性安全真空采血器代替常规的针头和注射器，这样可使采集到的血液直接流入有塞子的运输管和/或培养管，并且针头用后可以自毁。 4.管子应放在适当的容器里以备运往实验室（见第10章）和在实验室内运输（见本章实验室内标本的运输部份）。标本表格应放在防水的袋子或信封里。接收人员不应打开这些袋子，以防污染。 （二）标本管或标本容器的打开 1.标本管应该在生物安全柜里打开。 2.必须戴手套。推荐使用眼部和粘膜保护装置(护目镜或面罩/头盔）。 3.防护服外应再戴一个塑料围裙。 4.打开标本管的塞子时，应在手里先垫上一块吸水纸或纱布再握住塞子，防止溅出。 （三）用于显微镜观察的薄膜和涂片的操作 用显微技术检测固定并染色的血液、痰和排泄物等标本时，可能并未杀死涂片上的所有微生物和病毒，所以这些涂片等物品应用镊子来操作，妥善保存，并且在丢弃以前要消毒和/或高压灭菌。 （四）对组织标本的操作 应使用福尔马林固定。 应避免进行冰冻切片。如果必须进行的话，应罩住冷冻机，操作者戴防护面罩。消毒时，仪器的温度至少应升至20℃。 （五）消毒 推荐使用次氯酸盐和高级消毒剂进行消毒。一般新配制的次氯酸盐溶液有效氯含量应为1g/L，但用于消毒溢出的血液，有效氯含量则应为5g/L。戊二醛可用于表面消毒。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 洁净物与污染物分开放置 生物安全柜内感染性材料溢洒的处理 当发生少量溢洒时，应用吸收纸巾立即处理，并立即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所以物品进行擦洗。工作面消毒后应更换手套，不论是摘下手套还是更换手套都要消毒洗手。 若发生大量溢洒，液体会通过生物安全柜前面或后面的格栅流到下面去，生物安全柜内所有的物品都应该进行表面消毒并拿出生物安全柜，在确保生物安全柜的排水阀被关闭后，可将消毒液倒在工作台面上，使液体通过格栅流到排水盘上。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒和/或高压灭菌处理。 生物安全柜污染的清除（1） ☆ 在实验结束时，包括仪器在内的生物安全柜里的所有物品应清除表面污染后，才能移出安全柜； ☆ 在每次使用前后清除生物安全柜内表面的污染，工作台面和内壁要用消毒剂进行擦拭（杀灭任何微生物），但不包括送风滤器的扩散板； ☆ 在每天实验结束时，应擦拭生物安全柜的工作台面、四周以及玻璃的内外侧等部位以清除表面的污染。 ☆ 在对目标生物体有效时，可以采用漂白剂溶液或70%酒精来消毒。在使用如漂白剂等腐蚀性消毒剂后，还必须用无菌水再次进行擦拭。 ☆研究试剂溢漏或泼洒后，立即清除污染物及污染的表面 ☆在更换HEPA过滤器或内部维修之前，必须对已用于感染性材料工作的生物安全柜进行消毒 ☆在生物安全柜维护、更换过滤器、以及性能测试或重新安置之前，必需消毒 ☆最普通的气体消毒方法：甲醛熏蒸 ☆推荐将安全柜一直维持运行状态。如果要关闭的话，则应在关机前运行5min以净化内部的气体。 生物安全柜污染的清除（2） 禁用 非必需 工作台面和内壁要用消毒剂进行擦拭 不要擦拭送风滤器的扩散板！！！ 第四节 实验室仪器设备的使用规范 仪器使用中的相关危险 干燥器 爆裂、瓶子碎片和感染性物质飞出 培养物搅拌器，混合器，搅拌器 产生气溶胶、喷溅和溢出 皮下注射针头 意外接种 产生气溶胶或感染性物质溢出 离心机 产生气溶胶、溅出和管子破裂 超速离心机 管子破裂 高速搅拌器，组织匀浆器 飞沫、渗漏和容器破裂 超声波破碎机、超声波清洁器 产生气溶胶、听力受损、皮炎 冻干机（冷冻干燥机） 产生气溶胶、直接接触污染 水浴 微生物生长，叠氮化钠和一些金属形成爆炸复合物 1. 为防止感染，严禁用嘴吸液。应使用机械移液装置。 2. 所有的吸管都应该有棉塞以减少对移液器或吸球的污染。建议使用带有滤芯的吸头。在BSL-2及以上级别实验室中，最好避免使用玻璃吸管。 3. 对于感染性材料不能用吸管吹打来达到混匀的目的，操作时吸管应放入操作液面下的三分之二处，以防止产生气泡和气溶胶。从吸管吹出液体时也不要太用力，吸管内的液体应自动流出，不要强制性排出预留液。 4. 污染的吸管应立即浸没在含有适宜的消毒剂的防破碎的容器里。在处理之前，应浸泡足够长的时间。 盛装废弃吸管的容器（不锈钢盒子）应放在生物安全柜里 5. 严禁用带有注射针头的注射器吸液 6. 为防止从吸管滴落的感染性物质发生扩散，工作台表面应放一块具有吸收性能的材料，使用后应按感染性