化学发光免疫分析试剂操作规范.doc

化学发光免疫分析试剂操作规范 2011-01-11 化学发光免疫分析试剂操作规范化学闪光免疫分析试剂操作规范 一、试剂盒的保存 1.保存条件： 1.1试剂盒应放置于2~8℃冰箱中存放。 1.2试剂盒在取用过程中禁止颠倒,以避免试剂被污染。 1.3有特殊要求的试剂应严酷按照操作说明书要求的保存条件保存。 2.保存时间： 2.1未开封试剂盒于2~8℃保存时,可在有用期以内正常使用。 2.2已开封试剂盒每次使用后需及时放回2~8℃冰箱内保存,应尽可能在开封后1个月内使用。(按说明指示的开封的半制品有用期计算,尽量在半制品最短的有用期内用完) 一、标本的处置惩罚以及保存 1.标本收罗 1.1.要注意避免出现严重溶血。血红卵白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的酶促化学闪光测定中,如血清标本中血红卵白液体浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而使后面加入的HRP底物反应值偏高。 1.2.样本的收罗及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会匹敌原抗体等卵白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶自己会对用相应酶作标记的测定要领产生非特异性干扰。 1.3.常规项目对标本收罗的要求：晨起空腹、安静状态下、或者休息半小时后收罗。 1.4.如无特殊说明,源德公司试剂盒合用的标本类型均为血清；故采血时应选用非抗凝采血管。采血后应尽早离心,将血清分离后单独保存。 1.5.建议接纳真空采血管及蝶形针具,以免直接接触血液。收罗器皿最好为一次性无菌密闭器皿。采血后将真空采血管颠倒、轻轻混匀3~4次,不宜过猛,以避免溶血。 1.6.标本收罗时间及患者准备根据检测项目不同对标本的收罗要求也不相同,具体内部实质意义参见试剂盒说明书。 1.6.1激素：可的松峰值在早晨4~6点之间；生长激素、促黄体激素(LH)以及促卵泡激素(FSH)均以阵发性方式释放,须在密切相连的时间间隔内采取数份血样本,以资中心值为测定值。又如当从卧位变为站立位时,血清中肾素活性将出现明显增高。 1.6.2再如治疗药物的检测,应根据药代动力学选择服药后的最适时间抽血检测。 1.6.3用于传染性病原体的抗原以及抗体、肿瘤标志物以及特种卵白等的检测的血清标本的收集则没有时间以及体位方面的影响。 1.7.可能影响测定成果的标本因素 1.7.1内源性干扰因素：类风湿因子、补体、异嗜性抗体、治疗性抗体、自身抗体、溶菌酶、磷脂、药物小分子、总卵白液体浓度等。 1.7.2外源性干扰因素：溶血、细菌污染、标本存贮时间过长、凝集不全、反复冻融。 2.标本保存 2.1新鲜标本的检测成果更能准确反映机体的真实情况,建议用户在采血后24小时内完成检测。 2.2如24小时内不克不及进行检测,需将血清分离后于-20℃保存,同时避免反复冻融。 2.3特殊项目的要求：部分小分子激素由于受与结合卵白的结合状态等影响,需采取特殊保存方式,具体要去到场说明书。(例如：INS释放性实验,空腹血样保存)(E2,应检测冻存血样) 二、试剂准备 一、实验前,先将实验中所需的所有试剂及待测样品从冰箱中取出,待温度与室温(25℃)平衡1小时以上后使用。加样前应将所用试剂以及待测样本分别充分混匀。 2、酶结合物以及抗体混匀时,切实避免产生大量气泡儿。 3、实验中用于冻干品复溶以及稀释浓缩洗涤液所用的蒸馏水或去离子水应包管质量。 四、冻干品加入蒸馏水或去离子水后,应盖上胶塞后静置,待固体物质完全消融后,再将试剂瓶反扣在实验台上,让附着在瓶盖上的固体物质消融,然后充分混匀后待用。 三、加样器的使用及维护 一、加样器的规格：用户需配备以下三种规格加样器20μl、50μl、100μl各一支。 2、加样器的质量： 2.1加样器的质量将对实验成果的造成严重影响。 2.2由于可调量程加样器使用一段时间后,会造成吸液量不准,影响实验成果,故建议用户选择固定量程的加样器。 3、加样器的使用 见《加样器的使用规范及维护》 四、手工加样注意事项 4.1为包管加样的准确性,请经常勘正加样器。 4.2加试剂时,先吸打1~2次后再抽样。吸液速度宜慢,以包管正确的加样量。吸液后,将加样枪尖接触器皿壁,去掉可能形成的液体滴后再加入孔中。 4.3加样时,严禁带有气泡儿。加样头中若已经产生气泡儿,应先将气泡儿打净后,再行加样。 4.4加样本时,样本应加入液面以下,防止样本吸附在孔壁上不克不及与试剂反应。而在加底物时,加样器(加样枪)的枪尖应避免接触酶标板、校准品以及样品,以防止引起污染或交织污染(假阳性)。 4.5当使用单通道加样器手工加样时,使用一次性洁净枪头,每次加完一种试剂应该更换加样枪头,加待测样本的加样头必需每加完一个样本更换一次加样头。 五、加样头的质量 5.1应尽量选用加