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石斛组织培养与移栽研究 　　摘要 　　石斛又叫石斛兰，兰科石斛属植物。是我国古文献中最早记载的兰科植物之一。 本实验用1/2MS为基本培养基,添加不同的激素配制三种不同的培养基进行石斛兰试管苗快速繁殖和移栽的研究。结果表明:1/2MS-C配方石斛兰原球茎增殖最快。再按照1/2MS-C配方分别用纯净水[1]、蒸馏水[2]、自来水[3]作溶解剂配制三种不同的培养基对石斛进行组织培养，经多次试验后发现配方[1]石斛原球茎的增殖速度最快，数量最多。 　　关键词：石斛、组织培养、移栽 　　中图分类号：S223文献标识码： A 文章编号： 　　前言 　　植物的组织培养（tissue culture）是指通过无菌操作把植物体的器官、组织或细胞（即外植体）接种于人工配制的培养基上,在人工控制的环境条件下，使之生长, 发育成植株的技术与方法。由于培养物是脱离植物母体在试管中进行培养，所以也叫离体培养，或植物的细胞与组织培养。 植物组织培养是建立在植物细胞全能性学说的理论基础上，经过长期反复科研实践，逐步发展形成一套较为完整的技术体系。近二十年来，利用植物组织培养的方法不但在探求植物学的基本理论问题上已成为一个重要的手段，而且在应用上也逐渐表现出了它巨大潜力。在农业、林业及园艺等方面，组织和细胞技术已经用来培育作物新品种，复壮特殊的无病毒无性系，以及快速繁殖植物的无性系等。在花卉及草本植物方面，用无性繁殖系快速繁殖植株，使植物的生产工厂化和试管品种商品化，使目前植物组织和细胞培养在应用上的新动向。 园艺植物绝大多数良种是采用无性繁殖，以保持其优良性状的遗传稳定性和一致性。但传统的无性繁殖方法繁殖的数量小、速度慢，而离体培养繁殖的技术特点是繁殖系数大，周年生产，繁殖速度快，苗木整齐一致。例如兰花离体繁殖，一个外植体一年可繁殖400万个原球茎。兰科植物种类繁多，约有450个属.石斛兰属是兰科中最大的一个属，有一千多个种，在我国主要分布在西南和华南地区。 石斛又叫石斛兰，为兰科石斛属植物。是我国古文献中最早记载的兰科植物之一。石斛由于花形、花姿优美，艳丽多彩，种类繁多，且花枝长、花多、花期长，深受各国人民的喜爱和关注，在国际花卉市场上占有重要的位置。石斛是多年生落叶草木。茎丛生，直立，上部略成回折状，稍偏，黄绿色，具槽纹。叶近革质，矩圆形。总状花序，花大，白色，顶端淡紫色，落叶期开花。原产亚洲热带，喜高温多湿和一定光照。生长适温为25～30℃，冬季温度不低于10℃，常绿种类不低于15℃，喜温差在10～15℃，温差过小，影响枝叶生长。 石斛中有些种如铁皮石斛、金钗石斛等是名贵中药材，具有养胃生津、滋阴清热的功能，在我国传统医学上的应用历史悠久。石斛也是一种重要的观赏植物。几乎所有观赏植物栽培的石斛兰都是杂种。通过种子繁殖不能得到大量与亲代性状一致的植株。分株繁殖又速度太慢，满足不了生产上的需要。1967年Sagawa和Shoji报道了通过培养分生组织无性繁殖石斛兰的技术：从石斛兰幼茎的侧芽和顶芽上去切取芽的分生组织，培养在Konp C培养基上。3个月后，20％的顶芽和29 ％的侧芽分化出原球茎（Protocom-like bodies）。这些原球茎既可增殖，也可分化成完整的植株。继后，Kim、Kunisaki、Sagawa在加有椰子汁的Vacin 和Went培养基上成功的诱导了石斛兰的芽分化组织产生原球茎，并证明了长约5cm的幼茎上切取的外植体最好；顶芽和侧芽的诱导成功率分别为46.6％和 50.9％。 我们用组织培养技术建立了石斛兰的快速繁殖系。原球茎每隔20～30天即能繁殖几倍，在增殖过程中不断分化成小植株，繁殖迅速。此次，我们所进行的实验只是有关石斛兰在不同培养基上生长繁殖的初步研究，希望能够对有关石斛兰组织培养的研究起到辅助作用。 　　 材料与方法 　　1.实验材料供试品种为天津农学院提供的石斛兰2.实验方法2.1培养基的配制2.1.1以1/2MS为基本培养基，按照需要添加不同激素（NAA、IBA、6-BA）的培养基的配制。 　　先取适量去离子水溶解10g蔗糖，倒入1000ml容量瓶中，再用每种试剂母液专用的移液管取1、2、3、5号母液各10ml，4号母液2ml一一放入容量瓶中，再取0.4mol/l NAA加入容量瓶，并加入去离子水定容至1000ml。摇匀后倒入适当大小的蒸锅中，再取0.5g牛肉膏和7g琼脂粉加入蒸锅一同加热溶解，然后加入1.0mol/l的NaoH 10滴调节PH值至5.4～6.0之间。配制好培养基A: 1/2MS+0.4mol/lNAA 配制好的培养基要趁热分注，把培养基倒入已灭菌的三角瓶中，至容器的1/5左右，拧紧瓶盖，最后准备消毒培养基。 按照同样的方法，分别取0.4mol/lNAA和