P物质阿片肽在痛觉调制中的作用及药物对其影课件.ppt

疼痛信号在脊髓中的传递 脊髓水平的调制 SP对痛觉的调制 吉林大学白求恩第二医院 SP对痛觉信息的传递可能起双重作用： 1. 作为伤害信息传入纤维的神经递质，在脊髓背角、 三叉神经脊束核等部位对痛觉传递的第一级突触起 促进或易化作用。 2. 在脑内则发挥镇痛作用，对痛觉感受进行调制，降 低对痛觉的敏感度。   吉林大学白求恩第二医院 头痛宁胶囊及全蝎对偏头痛大鼠中枢阿片肽和P物质的影响 吉林大学白求恩第二医院 全蝎治疗各种风湿痹痛、三叉神经痛、头痛、癌肿疼痛均有较好的疗 效。国内对全蝎的镇痛作用研究始于八十年代，研究发现蝎毒对各类疼痛都 有很强的镇痛作用，并且认为全蝎的毒性成分可能是全蝎镇痛作用的有效成 分。李宁等向大鼠中脑导水管周围灰质内微量注射蝎毒和吗啡，观察比较两 者中枢镇痛效果，结果表明蝎毒有很强的中枢镇痛作用，强于吗啡4倍以上。 “头痛宁胶囊”药物组分，全蝎中蝎毒多肽为小分子形式，活性强， 可刺激血脑屏障开放，进入中枢而对各种头痛起治疗作用。但对于该药是否 作用于中枢内源性痛觉调制系统以及对内源性镇痛物质有何影响还不明确， 有待于深入研究。 立题依据 吉林大学白求恩第二医院 本研究通过观察全蝎以及头痛宁胶囊对偏头痛大鼠内 源性痛觉调制系统的核心结构——中脑导水管周围灰质中P物质 及内源性阿片肽的影响，研究全蝎以及“头痛宁”胶囊治疗偏 头痛的中枢作用，初步探讨全蝎及头痛宁胶囊对内源性痛 觉调制系统的影响。 立题依据 Wistar大鼠30只 对照组 偏头痛组 偏头痛大鼠模型 提取总RNA 光学显微镜 中脑导水管周围灰质区SP、亮氨酸脑啡肽和 β-内啡肽的分布及表达 观察行为学变化 中 脑 免疫组织化学染色 “头痛宁”治疗组 “全蝎”治疗组 “头痛宁”对照组 “全蝎”对照组 SP片段 脑啡肽原片段 重组质粒标准品 荧光定量标准曲线 SP mRNA 绝对定量 脑啡肽原 mRNA 绝对定量 脑组织 提取总RNA SP、脑啡肽原片段 技术路线 吉林大学白求恩第二医院 动物分组 选用成年健康Wistar大鼠30只，体重210±10g，分6组,每组5只： A组：对照组 B组：偏头痛组 C组：头痛宁胶囊对照组 E组：全蝎对照组 D组：头痛宁胶囊治疗组 F组：全蝎治疗组 实验方法 头痛宁胶囊 3.75g/Kg·d灌胃 给药7天 全蝎粉 0.26g/Kg·d 灌胃给药 连续给药7天 免疫组化 Wistar大鼠30只 对照组 偏头痛组 “头痛宁” 治疗组 “全蝎” 治疗组 “头痛宁” 对照组 “全蝎” 对照组 皮下注射生理盐水 2mL/kg 皮下注射硝酸甘油 10mg/kg 造模成功的指标：频繁挠头、爬笼、咬尾、往返运动 荧光定量PCR 吉林大学白求恩第二医院 60min-90min 行为学评价：挠头、爬笼、咬尾、往返运动的次数总和 （每个症状出现1次计1分） 中脑β－内啡肽，SP，MNK检测 2h 吉林大学白求恩第二医院 结果1：各组大鼠行为学评价 头痛宁治疗组和全蝎治疗组大鼠行为评分明显低于偏头痛组， 头痛宁治疗组大鼠行为学评分较全蝎治疗组评分更低。 吉林大学白求恩第二医院 结 果2. 全蝎对实验大鼠中脑脑啡肽原mRNA表达 全蝎可以降低正常大鼠中脑脑啡肽原基因表达，而当大鼠头痛时却可以提高其中脑脑啡肽原的基因表达。 吉林大学白求恩第二医院 结 果3.全蝎对实验大鼠中脑P物质 mRNA表达 偏头痛大鼠中脑P物质 mRNA表达减少；全蝎给药组大鼠中脑P物质 mRNA表达较对照组和偏头痛组无显著差异 吉林大学白求恩第二医院 结 果3.全蝎对实验大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响 对照组 偏头痛组 全蝎对照组 全蝎治疗组 各组 吉林大学白求恩第二医院 结 果3.全蝎对实验大鼠PAG区亮氨酸脑啡肽免疫阳性细胞数的影响 各组之间无显著差异 吉林大学白求恩第二医院 结 果4.全蝎对实验大鼠PAG区β-内啡肽阳性细胞数的影响 对照组 偏头痛组 全蝎对照组